293来源病毒包装细胞；ΦA操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
3）病毒包装准备：待细胞生长至适宜密度（通常约为70%-80%汇合），进行病毒包装前的预处理。移除细胞瓶中的培养基，用PBS轻柔洗涤细胞两次，以去除残留的培养基成分和死细胞。根据所使用的病毒包装系统（如慢病毒、腺相关病毒等），配制好相应的包装质粒和辅助质粒混合物，以及转染试剂。确保所有操作均在无菌条件下进行，避免污染。
4）病毒转染：将包装质粒混合物与转染试剂按预定比例混合，轻轻颠倒混匀后，室温静置一段时间（如15-20分钟），以形成转染复合物。随后，将此复合物逐滴加入到细胞瓶中，轻轻摇晃细胞瓶以确保均匀分布。将细胞瓶放回37℃温箱，继续培养。
5）病毒收集与纯化：转染后48-72小时，根据细胞状态和病毒产生情况，收集细胞上清液。利用超速离心、病毒纯化柱或亲和层析等方法，对病毒颗粒进行纯化，以提高病毒滴度和去除杂质。纯化后的病毒可储存于-80℃冰箱，供后续实验使用。在整个操作过程中，需严格遵循生物安全规范，防止病毒泄露和交叉感染。
