细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B培养
种属:Vero-HCV-NS5B

形态:上皮样细胞

培养方法

培养基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS　

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B培养的相关热销产品：
（标准品）质量规格：含量测定Lauric acid  RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA试剂盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  己糖激酶(HK)测试盒 可见分光光度法 50管/48样

结晶质量规格：>95%,BRCrystalline  小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA试剂盒大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Delta-催激素质量规格：>95%,BRDelta-MSH  Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠维生素K1(VK1)ELISA试剂盒  HumanInhibin,INH-AELISA试剂盒人抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

内皮素2，人，犬质量规格：>95%,BREndothelin 2 (human, canine)  Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit人膜攻击复合物(MAC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
犬肾损伤分子1(Kim-1)试剂盒 Canine kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit  4233-96-9没食子儿茶素没食子酸酯规格  GCG；Epigallocatechin gallate

英文名称HumanLpaELISAKit人脂蛋白(Lpa)规格：96T/48T  4233-96-9没食子儿茶素没食子酸酯   GCG；Epigallocatechin gallate

沉淀法去内试剂盒20  美迪紫檀素说明书  Medicarpin

Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒规格：96T/48T  480-36-4蒙花苷品牌  Buddleoside

小鼠配体超家族成员13(TNFSF13)ELISA试剂盒 ，英文名： TNFSF13 ELISA Kit  20283-92-5迷迭香酸规格  Rosmarinic acid
512-04-9薯蓣皂苷元说明书  Diosgenin  植物源性食品腰果(cashew)试剂盒20

511-96-6支脱皂苷元   Gitogenin   植物源性食品小麦(wheat)试剂盒20

51059-44-0汉黄芩苷说明书  Wogonoside   植物源性食品土豆(potato)试剂盒20

510-30-5刺囊酸说明书  Echinocystic acid   植物源性食品山核桃(pecan)试剂盒20

510-30-5刺囊酸规格  Echinocystic acid   植物源性食品开心果(Pistachio)试剂盒20
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B培养犬维生素A(VA)ELISA检测试剂盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T  487-41-2连翘苷   Phillyrin

犬透明质酸酶1(HAase 1)试剂盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit  79916-77-1连翘脂苷A说明书  Forsythoside A

英文名称HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人β(TNFβ)规格：96T/48T  81525-13-5连翘脂苷B品牌  Forsythoside B

超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50  2586-96-1莲心碱规格  Liensinine

ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA试剂盒大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒规格：96T/48T  5088-90-4莲心碱高氯酸盐   Liensinine Perchlorate