细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
正常人食管细胞说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　正常人食管细胞说明书
种属:Het-1A

类型:贴壁生长

形态:epithelial上皮细胞样

分离基物SV40大T抗原转位

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

安全等级:1

模式菌株:未知

应用领域The cell line may be useful for investigating the action of putative esophageal carcinogens.

培养方法

培养基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸钠）+10%FBS

生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

存储条件:90%FBS+10%DMSO 液氮

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到正常人食管细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是正常人食管细胞说明书的相关热销产品：
孕二烯酮(标准品)Gestodene质量规格：>99%,标准品  小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒 ，英文名： VB6 ELISA Kit  ELISAKitET小鼠内规格：48T/96T

马来酸阿扎他啶Azatadine Maleate质量规格：>98%,BR  小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA检测试剂盒MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T  HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

盐酸班布特罗(标准品)Bambuterol HCl质量规格：≥98%,标准品  人果糖二1酸缩酶A(ALDOA)试剂盒 Human ALDOA ELISA kit  人类白细胞抗原E(HLA-E)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

盐酸班布特罗Bambuterol HCl质量规格：≥98%,BR,可用于细胞培养  Ratendotoxin,ETELISAKit大鼠内(ET)ELISA试剂盒规格：96T/48T  小鼠葡萄糖激酶(GCK)试剂盒 Mouse Glucokinase,GCK ELISA kit
犬维生素A(VA)ELISA检测试剂盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T  487-41-2连翘苷   Phillyrin

犬透明质酸酶1(HAase 1)试剂盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit  79916-77-1连翘脂苷A说明书  Forsythoside A

英文名称HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人β(TNFβ)规格：96T/48T  81525-13-5连翘脂苷B品牌  Forsythoside B

超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50  2586-96-1莲心碱规格  Liensinine

ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA试剂盒大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒规格：96T/48T  5088-90-4莲心碱高氯酸盐   Liensinine Perchlorate
530-57-4丁香酸   Syringic acid   猪瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒PorcineLeptin,LEPELISAKit 96T/48T

5302-45-4三七素品牌  dencichine  猪生长抑素(SS)ELISA检测试剂盒PorcineSomatostatin,SSELISAKit 96T/48T

529-59-9染料木苷规格  Genistin  猪生长激素(GH)ELISA检测试剂盒Porcinegrowthhormone,GHELISAKit 96T/48T

529-53-3野黄芩素品牌  Scutellarein  猪皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA检测试剂盒PorcineCoicosterone,COELISAKit 96T/48T

529-53-3野黄芩素规格  Scutellarein   猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA检测试剂盒PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T
正常人食管细胞说明书犬球蛋白G(IgG)试剂盒 Dog Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit  15291-75-5银杏内酯A规格  Ginkgolide A

英文名称HumanOxLDLELISAKit人氧化(OxLDL)规格：96T/48T  15291-77-7银杏内酯B   Ginkgolide B

化微粒体1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量检测试剂盒20  15291-76-6银杏内酯C说明书  Ginkgolide C

RatImmunoglobulinM,IgMELISA试剂盒大鼠球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T  107438-79-9银杏内酯J品牌  Ginkgolide J

小鼠粘蛋白4(MUC4)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC4 ELISA Kit  481-46-9银杏素规格  Ginkgetin