细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
袋鼠肾细胞说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　袋鼠肾细胞说明书
种属:Pt K1 (NBL-3)

类型:肾

形态:上皮样

培养方法

培养基:MEM培养基(GIBCO,货号41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到袋鼠肾细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是袋鼠肾细胞说明书的相关热销产品：
正壬醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)1-Nonanol  RatCrosslaps,CrELISA试剂盒大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒规格：96T/48T  鸟酸基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒 ，英文名： OCT ELISA Kit

壬酸(Standard for GC ,>99%(GC))质量规格：Standard for GC ,>99%(GC) Nonoic acid  小鼠肝细胞生长因子激活物(HGFAC)ELISA试剂盒 ，英文名： HGFAC ELISA Kit  rabbitthyroxine,T4ELISA试剂盒兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

正辛醇(Standard for GC,>99.5%)质量规格：Standard for GC,>99.5%n-Octanol  大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA检测试剂盒RatThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 96T/48T  HumanBlockingaibody,BAELISA试剂盒人封闭抗体(BA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.0%(GC)Undecanoic acid  人白介素2诱导的T细胞激酶(ITK)试剂盒 Human ITK ELISA kit  HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
英文名称HumanansferrieceptorELISAKit人转铁蛋白受体(TFR)ELISA试剂盒规格：96T/48T  10338-51-9红景天苷   Salidroside

超氧化物歧化酶(SOD)红细胞裂解样品制备试剂盒50  28608-75-5荭草苷说明书  Orientin

Ratglycogensyhasekinase,GSKELISA试剂盒大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒规格：96T/48T  35354-74-6和厚朴酚品牌  Honokiol

小鼠转化生长因子β受体Ⅰ(TGFβR1)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFβR1 ELISA Kit  528-43-8厚朴酚规格  Magnolol

犬骨桥素(OPN)ELISA检测试剂盒CanineOsteopoin,OPNELISAKit 96T/48T  27409-30-9胡黄连苷I   Picroside I
6020-18-4黄连碱品牌  Coptisine chloride   猪脂多糖结合蛋白(LBP)试剂盒 Pig lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit

60137-06-6雪胆素甲品牌  Cucurbitacin Ⅱa   猪脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)试剂盒 Pig lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit

60137-06-6雪胆素甲规格  Curcurbitacin IIa  猪脂蛋白脂酶(LPL)试剂盒 Pig lipoprotein lipase,LPL ELISA kit

6”-丙二酸沙苑子苷单酯   6’’-malonate-complanatuside  猪脂蛋白α(Lp-α)试剂盒 Porcine Lp-α ELISA Kit

59870-68-7光甘草定品牌  Glabridin   猪正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)试剂盒 Pig regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RAES ELISA Kit
袋鼠肾细胞说明书猴白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T  26339-90-2七叶皂苷B品牌  Escin IB

犬基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒 Dog Maix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit  123748-68-5七叶皂苷A规格  Escin IA

英文名称HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorELISAKit人内皮细胞生长因子(VEGF)ELISAKit规格：96T/48T  781658-23-94-羟基异亮氨酸   4-Hydroxyisoleucine

化线粒体溶解试剂盒20  51330-27-9大豆皂苷Bb说明书  Soyasaponin BB

RatIerferonα,IFN-αELISA试剂盒大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T  67879-58-7单咖啡酰洒石酸品牌  2-Caffeoyl-L-tartaric acid