牛骨骼肌卫星细胞培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　牛骨骼肌卫星细胞培养
种属:BSMSCs

类型:贴壁生长

形态:上皮细胞样，细胞为不规则形态，有梭形，密度大时紧密排列成铺路石样排列。

分离基物牛，

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90%高糖DMEM+10%FBS,1%-1.5%双抗

传代方法:传代比例是：1:2-1:3.

生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

存储条件:90%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是牛骨骼肌卫星细胞培养的相关热销产品：
粘蛋白质量规格：Type I-S; from bovine submaxillary glandsMucin from bovine submaxillary glands  ELISAKitPLAP人胎盘碱性1酸酶规格：48T/96T  类白细胞抗原B27(HLA-B27)ELISA试剂盒 ，英文名： HLA-B27 ELISA Kit

N,N'-二琥珀基碳酸酯(>98%,EP)质量规格：>98%,EPN,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC)  小鼠胆囊收缩素B受体(CCKBR)ELISA试剂盒 ，英文名： CCKBR ELISA Kit  RatCollageypeⅡ,ColⅡELISA试剂盒大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

滂胺天蓝(~50%,BS)质量规格：~50%,BSChicago sky blue 6B  人神经髓鞘蛋白(p2)ELISA检测试剂盒Humanmyelinprotein2,p2ELISAKit 96T/48T  HumanCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISA试剂盒人环1酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氯铵-T三水(>质量规格：>98%,BRChloramine T, trihydrate  大鼠母亲DPP同源物4(Smad 4)试剂盒 Rat mothers against decapeaplegic homolog 4,Smad4 ELISA Kit  HumanGlucagon，GCELISAKit人胰素(GC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
载玻片细胞INSULI-ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  11013-97-1甲基橙皮苷规格  Methyl hesperidin

humanβ-tubulin,TUBBELISA试剂盒人β-微管蛋白(TUBB)ELISA试剂盒规格：96T/48T  38763-29-0甲基黄连碱   Worenine

小鼠转化生长因子α(TGFα)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFα ELISA Kit  2292-16-2甲基莲心碱说明书  Neferine

小鼠葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISA检测试剂盒MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 96T/48T  74805-92-8甲基麦冬二氢高异黄酮A品牌  Methylophiopogonanone A

人抗SS-A/Ro抗体试剂盒 Human SS-A/Ro aibody ELISA kit  74805-91-7甲基麦冬二氢高异黄酮B规格  Methylophiopogonanone B
55481-88-4大叶茜草素规格  Mollugin   猪生成素2(ANG-2)试剂盒 Porcine ANG-2 ELISA Kit

55466-05-2酸枣仁皂苷B说明书  Jujuboside B  猪生成素2(ANG-2)ELISA检测试剂盒PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T

55466-04-1酸枣仁皂苷A   Jujuboside A  猪生成素1(ANG-1)试剂盒 Porcine ANG-1 ELISA Kit

553-21-9木香烃内酯规格  Costundide  猪生成素1(ANG-1)ELISA检测试剂盒PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T

55297-87-5法卡林二醇说明书  Bitte angeben     猪内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA检测试剂盒PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit 96T/48T
牛骨骼肌卫星细胞培养犬5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒Canine5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T  65604-80-0麦冬皂苷D'品牌  ophiopogonin D'

犬水通道蛋白5(AQP5)试剂盒 Dog aquaporin-5,AQP5 ELISA kit  57-87-4甾醇规格  Ergosterol

英文名称HumanLBPELISAKit人脂多糖结合蛋白(LBP)规格：96T/48T  479-91-4蔓荆子黄素   Vitexicarpin

超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50  88105-29-7三七皂苷Fe说明书  Notoginsenoside Fe

RatHeatShockFactor1,HSF1ELISA试剂盒大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  冬青素A品牌  Ilexgenin A
收到牛骨骼肌卫星细胞培养处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。