细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
猪胚胎睾丸传代细胞形态冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　猪胚胎睾丸传代细胞形态
种属:ST

形态:上皮细胞样

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS　

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到猪胚胎睾丸传代细胞形态处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是猪胚胎睾丸传代细胞形态的相关热销产品：
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Decyl alcohol质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)  小鼠ELISA试剂盒  素B2(TXB2)ELISA试剂盒 ，英文名： TXB2 ELISA Kit

琥珀(standard for GC,≥99.6%(GC))Diethyl succinate质量规格：standard for GC,≥99.6%(GC)  小鼠前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒 ，英文名： PK2 ELISA Kit  MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA试剂盒小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

癸二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Diethyl sebacate质量规格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)  人维生素D2(VD2)ELISA检测试剂盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T  ELISAKitS-100小鼠S100蛋白规格：48T/96T

二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))Docosane质量规格：standard for GC,≥99.0%(GC)  大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)试剂盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit  Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA检测试剂盒Mousecatecholamine,CAELISAKit 96T/48T  57420-46-9胡麻属苷品牌  Sesamoside

人抗α-胞衬蛋白抗体(IgG)试剂盒 Human ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit  98243-57-3湖贝甲素规格  Hupehenine

RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格：96T/48T  535-83-1葫芦巴碱   Trigonelline

载玻片细胞GSK-3BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  1370264-16-6拟人参皂苷-Rh2说明书  3-O-β-D-glucopyranosyl-3β,12β,25-trihydroxyldammar-(E)-20(22)-ene

Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA试剂盒人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格：96T/48T  6199-67-3葫芦素B品牌  Cucurbitacin B
59-30-3叶酸说明书  Folic acid   猪早老素2(PS-2)试剂盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

59219-65-7豯莶苷品牌  Darutoside  猪早老素1(PS-1)试剂盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit

590-46-5盐酸甜菜碱说明书  Betaine   猪载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒 Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit

58812-37-6川楝素规格  Toosendanin   猪载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒 Porcine apo-B100 ELISA Kit

58749-23-8甘草查尔酮B规格  Licochalcone B   猪载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA检测试剂盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T
猪胚胎睾丸传代细胞形态化大鼠肾上腺髓质素(AM)基因重组表达载体(pGEFP-AM)10微克  64849-39-4甜叶悬钩子苷说明书  Rubusoside

RatHistoneDeacetylase,HDELISA试剂盒大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒规格：96T/48T  20137-37-5铁冬青酸品牌  Rutundicacid 

小鼠脂多糖/内(LPS)ELISA试剂盒 ，英文名： LPS ELISA Kit  191729-45-0通关藤苷H规格  Tenacissoside H

小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA检测试剂盒Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit 96T/48T  928151-78-4通关藤苷F   Tenacissoside F

人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)试剂盒 Human MIF ELISA Kit  191729-44-9通关藤苷I说明书  Tenacissoside I