猪小肠上皮细胞说明书冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　猪小肠上皮细胞说明书
种属:IPEC-1

类型:贴壁

分离基物猪，小肠；上皮细胞；自发永生

安全等级:1

模式菌株:未知

培养方法

培养基:1640，90%；FBS，10%；双抗

生长条件:Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存储条件:Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%（for reference） Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是猪小肠上皮细胞说明书的相关热销产品：
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芝麻林素（标准品）Sesamolin质量规格：HPLC≥98%，标准品  小鼠凝血酶受体()ELISA检测试剂盒Mousethrombieceptor,ELISAKit 96T/48T  Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit人血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

芝麻素Sesamin质量规格：HPLC≥98%，BR  人抗补体1q抗体(ai-C1q-aibody)试剂盒 Human ai-C1q-aibody ELISA Kit  人紧张素原(aGT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

芝麻素(标准品)Sesamin质量规格：HPLC≥98%,标准品  RabbitTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T  猪神经特异性烯醇化酶(NSE)试剂盒 Pig Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit
RabbitoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  481-74-3大黄酚   Chrysophanol

载玻片细胞ERBETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  518-82-1大黄素说明书  Emodin

humanβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA试剂盒人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒规格：96T/48T  478-43-3大黄酸品牌  Rhein

小鼠阻抑素(PHB)ELISA试剂盒 ，英文名： PHB ELISA Kit  38840-23-2大黄素-1-O-葡萄糖苷规格  Emodin-1-O-glucoside

猫α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒FelisIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T  23313-21-5大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷   Emodin-8-glucoside
751-03-1黄柏酮   Obacunone   组织1酸葡萄糖异构酶(phosphoglucoseisomerase;GPI)活性光谱法定量检测试剂盒20

74805-92-8麦冬甲基黄烷酮A   Methylophiopogonanone A   组织1酸葡萄糖变位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光谱法定量检测试剂盒20

74805-92-8甲基麦冬二氢高异黄酮A品牌  Methylophiopogonanone A   组织1酸甲戊二羟酸激酶(phosphomevalonatekinase)活性比色法定量检测试剂盒20

74805-91-7甲基麦冬二氢高异黄酮B规格  Methylophiopogonanone B   组织1酸果糖激酶(PHOSPHOFRUCTOKINASE)酶连续循环比色法定量检测试剂盒20

74805-90-6甲基麦冬黄酮A品牌  Methylophiopogonone A   组织1酸二酯酶5(PDE5)活性荧光定量检测试剂盒10
猪小肠上皮细胞说明书RatIerleukin11,IL-11ELISA试剂盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格：96T/48T  484-20-8佛手柑内酯   5-Methoxypsoralen

小鼠抑制素βC(INHβC)ELISA试剂盒 ，英文名： INHβC ELISA Kit  298-81-7花椒说明书  8-Methoxypsoralen

兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA检测试剂盒Rabbitsolubleadhesionmolecules,SamELISAKit 96T/48T  465-99-6常春藤皂苷元品牌  Hederagenin

犬环加氧酶2(COX-2)试剂盒 Dog cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA kit  10284-63-6D-松醇规格  3-O-Methyl-D-chiro-inositol; D-(+)-chiro-Inositol

英文名称Humancardioophln-lELISAKit人心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  491-80-5鹰嘴豆芽素A   Biochanin A
收到猪小肠上皮细胞说明书处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。