人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞 冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞
种属:NK-92MI

类型:悬浮生长

形态:淋巴母细胞

分离基物NK细胞；；男性

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90%RPMI-1640+10%FBS

生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

存储条件:90%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞 的相关热销产品：
CEM/C1(人急性细胞细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸D-甘露糖，英文名或英文缩写：D-Mannosamine HC1，级别：高，98%，规格：25毫克

HUtSMC Pellet 人细胞团块 > 1 mio.cells 人表皮角质细胞-cDNAHEK-acDNA鳞醋硼,水合 BORON PHOSPHcTq 13308-21-2

CL-0098HCT-8(人盲肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×23-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二本基溴化四氮唑噻唑蓝，英文名或英文缩写：MTT，级别：超，99%，规格：500克

RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 二氧化锆，英文名或英文缩写：Zirconium dioxide，级别：5N，规格：25克

人小脑星形胶质细胞裂解物HA-c LNeomycinSulfate 5g/25g/100g INALCO原装
615小鼠株;Ca759二甲磺酸阿米三嗪（标准品）质量规格：含量测定Almitrine Bismesylate

OSTM1 Others Human 人 OSTM1 人细胞裂解液 (阳性对照) 萝巴新（标准品）质量规格：含量测定Raubasine

AsoFectagen?星形细胞转染试剂盒卡莫氟(标准品)质量规格：供HPLC法含量测定用Carmofur

FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼可占替诺（烟酸占替诺）标准品质量规格：供HPLC法含量测定用Xanthinol nicotinate

CatL2 家猫肺成纤维样细胞盐酸黄酮哌酯（标准品）质量规格：含量测定Flavoxate
大鼠神经皮质细胞(RNc)(1×106) SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人*癌细胞 Human醌-2-磺酸钠shēng huà shì jì容量：RT1毫克

人胚胎皮肤成纤维细胞;HES粘液酸 Mucic acid,98% 526-99-8 25G 通用试剂

SCN2B Others Human 人 SCN2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 羌炳基-β-环糊精 xy7noxypropyl Bqtcdqx 18446-32-2

C57BL/6小鼠胚胎干细胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells超氧化物歧化酶(抽取法)测试盒50块/箱

RPMI-8226细胞，人细胞 单核细胞增生李斯特氏菌 SV40T转化人脐内皮细胞;PUMC-HUVEC-T11866-15-5化乙酰硫代胆碱(+4℃)ACETYLTHIOCHOLINE IODIDE
人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞 人口腔角质细胞裂解物HOKL蛋白酶1底物2m，荧光Caspase 1 Substrate 2m (ICE),fluorogenic; Ac-YVAD-AMC质量规格：>95%,BR

IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人细胞裂解液 (阳性对照) 蛋白酶3底物1m，荧光Caspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC质量规格：>95%,BR

BRL-3A 大鼠正常肝细胞抗菌肽B;天蚕丝抗菌肽Cecropin B质量规格：>95%,BR

CL-0118HT-29(人细胞)5×106cells/瓶×2卡律蝎Charybdotoxin质量规格：>95%,BR

人绒毛间充质成纤维细胞促皮质素释放因子，绵羊Corticotropin Releasing Factor,ovine质量规格：>95%,BR
收到人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞 处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。