幼仓鼠肾传代细胞培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　幼仓鼠肾传代细胞培养
种属:BHK21

形态:上皮样

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生长特性:贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是幼仓鼠肾传代细胞培养的相关热销产品：
人肝脏细胞裂解物HHL乳糖胆盐发酵管培养基shēng huà shì jì容量：2～8℃1.5克

UACC812细胞，人导管瘤细胞 鼠腹水瘤,EAC-E2G8细胞 脑动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)4-基-2，6-二肖基酚 2,6-bqnzcldqhydq 606-31-2

BEL-7405(人细胞) 5×106cells/瓶×2钼嶙酸钠，英文名或英文缩写：wo7ium phosphomolybdate hydrate，级别：BR，95%，规格：500克

HPASMC Pellet 人肺动脉平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人肝脏细胞裂解物HHLAMMONIUMSULFATE胺超级白色结晶粉末RTsigma

CL-0154MDCK(犬肾细胞)5×106cells/瓶×2122-97-43-本基-1-;γ-本;氢化肉桂醇;3-本;γ-羟基丙基本3-pxenyl-1-propanol;xy7nocinnaMic alcohol;xy7nocinnaMyl alcohol;3-pxenylpropanol;3-pxenylpropyl alcohol;γ-xy7noxypropylbenzene
Ana-1小鼠巨噬细胞 Mouse macrophage Ana-1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS马兜铃酸A质量规格：HPLC≥98%，标准品Aristolochic acid A

IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签)羟基茜草素/红紫素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Purpurin

人小脑颗粒细胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓间充质干细胞(hMSCs) EC109，人细胞反式丁1醛(standard for GC)质量规格：standard for GC(E)-2-Butenal

CM-H129人视网膜色素上皮细胞完全培养基100mL十二烷(Standard for GC,≥99.5% (GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5% (GC)Dodecane

LAYN Others Cynomolgus 食蟹猴 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 正癸酸(Standard for GC,>99%(GC))质量规格：Standard for GC,>99%(GC) Decanoic acid
T-47D(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2N,N-羰基二咪唑质量规格：>98%1,1'-Carbonyldiimidazole

HCMEC-c 人类*微内皮细胞(HCMEC) 500,000cells 脑平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)LY2835219质量规格：>98%，CDK4 和CDK6选择性抑制剂LY2835219

神经胶质细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)LEE011质量规格：>98%,高度特异性CDK4/6抑制剂LEE011

SORCS1 Others Human 人 SORCS1 人细胞裂解液 (阳性对照) MG132,蛋白酶体抑制剂质量规格：>98%，proteasome抑制剂MG-132

Oregon vole 俄勒冈地鼠PD184352 (CI-1040)质量规格：>99%,MEK1/2抑制剂PD-184352 (CI-1040)
幼仓鼠肾传代细胞培养EFNA5 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)对氨基水杨酸钠（标准品） Aminosalicylate Dihydrate质量规格：供HPLC法含量测定用

A875(人色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1亚甲蓝（标准品）Methylthioninium Chloride Trihydrate质量规格：含量测定

人慢性髓系细胞;K562华法林钠（标准品）Warfarin 质量规格：供HPLC法含量测定用

CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人细胞裂解液 (阳性对照) 华法林钠Warfarin 质量规格：>98%,BR

C57BL/6小鼠脂肪间质干细胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells洛莫司汀（标准品）Lomustine质量规格：HPLC含量测定
收到幼仓鼠肾传代细胞培养处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。