细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
猪内皮细胞形态冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　猪内皮细胞形态
种属:ZYM-SVEC01

形态:上皮细胞样

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到猪内皮细胞形态处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是猪内皮细胞形态的相关热销产品：
CD8A Others Mouse 小鼠 CD8a / Lyt2 人细胞裂解液 (阳性对照) 褪素,果体素质量规格：>99%,BRMelatonine

EB病毒转化的人B细胞(傣族);KM9403褪素,果体素（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Melatonine

MMGT1 Others Human 人 MMGT1 / EMC5 人细胞裂解液 (阳性对照) 瑞替加滨质量规格：HPLC>95%,Retigabine

CL-0400NCI-H358(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2利巴韦林质量规格：>99%,BRRibavirin

NISE-Sacy-12细胞，蓖麻蚕卵细胞 人原髓细胞细胞,HL60细胞 人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2利巴韦林（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Ribavirin
Ca Ski 人肠转移细胞盐酸贝他定质量规格：美国进口Bestatin

HCCC-9810人胆管细胞型细胞 HCCC-9810 human cholangiocarcinoma cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-去甲基二盐酸三氟拉嗪质量规格：美国进口N-Desmethyl Trifluoperazine Di

TGFB1 Protein Human 重组人 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 标签)双硫仑-d20质量规格：美国进口Disulfiram-d20

人髓核细胞(HNPC)(5×105) NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 Mouse脱氧胆酸钠盐质量规格：美国进口Deoxycholic Acid,  Salt

小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP二乙二醇二丁基(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Diethylene Glycol Dibutyl Ether
NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 Mouse对本二酚100毫克

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人细胞裂解液 (阳性对照) 雾抑制剂 Chromium-fog inhibitor

人表皮色素细胞-深色素cDNAHEM-d cDNA聚乙二醇 6000 Poly(ethylene glycol) 6,000 (PEG6000) 25322-68-3 500G 通用试剂

IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Ierferon Gamma 人细胞裂解液 (阳性对照) 肠道菌计数琼脂100克

小鼠胚胎成纤维细胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)(D-半乳糖醛酸)
猪内皮细胞形态CEACAM6 Others Human 人 CD66c / CEACAM6 人细胞裂解液 (阳性对照) 二甲基亚砜(色谱级)Dimethyl sulfoxide质量规格：for HPLC, ≥99.7%

人脑星形胶质母细胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]N,N-二甲基乙酰胺(色谱级)N-N-Dimethylacetamide质量规格：for HPLC,≥99.8%(GC)

EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 (aa 570-987) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甘油(色谱级)Glycerol in water for HPLC verification质量规格：for HPLC,≥99.5%

mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞十二烷基三甲基氯化胺[离子对色谱级]IPC-DTMA-Cl质量规格：离子对色谱用试剂

RLF, 大鼠成纤维细胞 STJ.EPI.H7细胞 COS-1(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞)乙酸二丁基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]IPC-DBAA (ca.  0.5mol/L in Water)质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂