细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
人脐内皮细胞形态冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人脐内皮细胞形态
种属:HUVEC

类型:贴壁生长

形态:CM15-1培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形，短粗的梭形

分离基物人，脐；内皮细胞。女性，年龄未指明，有限细胞系

提供形式:冻存管/T25细胞瓶

安全等级:1

模式菌株:未知

应用领域可用于内皮修复损伤的研究。

培养方法

传代方法:将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约3min取出。传代用12mL CM15-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件:37℃，5%CO2，CM15-1培养液。CM15-1培养液：90%F-12K+10%FBS+0.1mg/mL heparin+0.03~0.05mg/mLECGS。F-12K：F-12K培养液。生长因子：heparin（肝素），ECGS（内皮细胞生长添加剂）。

存储条件:冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人脐内皮细胞形态处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人脐内皮细胞形态的相关热销产品：
HL-7702(人肝正常细胞) 5×106cells/瓶×2 RLF, 大鼠成纤维细胞 人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN铜标准溶液（500mg/l,溶剂:1%硫酸）质量规格：500mg/l,溶剂:1%硫酸Copper solution

EB病毒转化的人B细胞;KM932铬标准溶液（三价铬标准溶液1000μg/ml）质量规格：三价铬标准溶液1000μg/mlChromium solution

MERTK Others Human 人 MERTK / Mer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1酸二氢钠一水(ACS级)质量规格：ACS级,>98.5% phosphate, monobasic, monohydrate

CM-H046人肝星形细胞完全培养基100mL葡萄糖酸钙质量规格：>99%Calcium gluconate, hydrate

HL-60, 人早幼粒细胞 单核细胞-巨噬细胞,RAW264.7细胞 Hep G2(人细胞)十二烷基-β-D-麦芽糖苷;月桂酰基麦芽糖苷质量规格：>99%,分子生物学级N-Dodecyl-b-maltoside
caski L-顺式-盐酸地尔硫卓质量规格：美国进口L-cis-Diltiazem ? HCl

Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒构建稳定株)小鼠细胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS地尔硫卓质量规格：美国进口Diltiazem

TNFSF11 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 标签)去乙酰地尔硫卓-d3质量规格：美国进口Desacetyl Diltiazem-d3

人主动脉平滑肌细胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 HumanO-去甲基地尔硫卓质量规格：美国进口O-Desmethyl Diltiazem

小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH2地美司钠-d8质量规格：美国进口Dimesna-d8
MA, 小鼠星形胶质细胞 Mouse无水录化钴100克

ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人细胞裂解液 (阳性对照) 姆沙伯 W NAW Chromosorb W-NcW

人T瘤转基因细胞;Jurkat D,E植酸钠 Phytic Acid  (InsP6) 14306-25-3 5G 通用试剂

NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 葡萄糖胰蛋白胨琼脂25毫升

CM-R030大鼠肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL(糊精)
人脐内皮细胞形态PVRL3 Others Human 人 PVRL3 / CD113 人细胞裂解液 (阳性对照) 二乙二醇二丁基(>98.0%(GC))Diethylene Glycol Dibutyl Ether质量规格：>98.0%(GC)

人内根壳细胞裂解物HHIRSCL二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC))Diethylene Glycol Diacetate质量规格：>98.0%(GC)

CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC))Triethylene Glycol Diacetate质量规格：>98.0%(GC)

人脑微内皮细胞完全培养基 100mLO-乙酰基蓖麻酸甲酯(>80.0%(GC))Methyl O-Acetylricinoleate质量规格：>80.0%(GC)

MC3T3-E1细胞，小鼠成骨细胞系 V79(中国仓鼠肺细胞) 家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC柠檬酸三乙酯(>99.0%(GC))Triethyl 质量规格：>99.0%(GC)