人胃粘膜细胞培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人胃粘膜细胞培养
种属:GES 1

类型:贴壁生长

形态:CM2-1培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形、圆形或椭圆形

分离基物胃粘膜；SV40转化

提供形式:复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。

安全等级:1

模式菌株:未知

培养方法

传代方法:将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约3min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件:37℃，5%CO2，CM2-1培养液。CM2-1培养液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培养基，含谷氨酰胺。

存储条件:冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人胃粘膜细胞培养的相关热销产品：
CM-H054人子宫成纤维细胞完全培养基100mL乙酸镧五水(>99%,BR)质量规格：>99%,BRLanthanum (III) acetate, pentahydrate

MDA-MB-231, 人癌细胞 ,P3-X63-Ag8细胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人)L-刀豆氨酸硫酸盐(>质量规格：>98%,BRL-Canavanine sulfate salt

小鼠正常肝细胞;NCTC 1469 [NCTC1469]马来酸氟吡汀质量规格：>98%Flupirtine maleate

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸氟吡汀(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Flupirtine maleate

EB病毒转化的人B细胞;KM933氟维司群质量规格：>99%,进分,ER(雌激素受体)拮抗剂Fulvestrant
CCD-1095Sk细胞，人浸润性导管癌旁皮肤细胞 鼠细胞,H22-H8D8细胞 脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2,4,6-三(七氟丙基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine

BC3H1(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2α-巯基甘油(>98.0%(GC)(T))质量规格：>98.0%(GC)(T)α-Thioglycerol

HUASMC Pellet 人脐动脉平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人上皮细胞裂解物HPEpiCL3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸(>99.0%(GC)(T))质量规格：>99.0%(GC)(T)3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid

CL-0162MS1(小鼠胰岛内皮细胞)5×106cells/瓶×24'-羟基偶氮苯-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic Acid

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 2,2-二甲基琥珀酸(>99%,BR)质量规格：>99%,BR2,2-Dimethylsuccinic acid
Pcc4 小鼠wo7iumCaprylate正辛酸钠250毫克AR，90%

CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-羌基-2,4,6-三溴本加醋 (TBHBA) 3-xy7noxy-2,4,6-tribromobqnzoic ccid 14348-40-4

人神经胶质细胞瘤细胞;U251Rosiglitazone马来酸罗格列酮100毫克BR

20. 细胞系统Dysprosium(III)oxide三氧化二镝25毫升CP，95%

CM-H128人角膜上皮细胞完全培养基100mL143-24-8四乙二醇二;二甲氧基四缩乙二醇;四甘醇二;双二乙氧基Tetraetxylene glycol dimetxyl ;Dimetxoxytetraglycol;Dimetxoxytetraetxyleneglycol;TetraglyMe;Bis(2-metxoxy-ethoxyetxyl)
人胃粘膜细胞培养杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7伐地那非-d5Vardenafil-d5质量规格：美国进口

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4 胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL盐酸贝他定Bestatin 质量规格：美国进口

C2C12, 小鼠肌原细胞 MouseN-去甲基二盐酸三氟拉嗪N-Desmethyl Trifluoperazine Di质量规格：美国进口

TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人细胞裂解液 (阳性对照) 双硫仑-d20Disulfiram-d20质量规格：美国进口

人内根鞘细胞HHIRSC脱氧胆酸钠盐Deoxycholic Acid,  Salt质量规格：美国进口
收到人胃粘膜细胞培养处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。