资源名称　鸡胚成纤维细胞产品仅用于科研
种属:CEF

类型:贴壁生长

形态:CM1-1培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形

分离基物胚胎

提供形式:复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。

安全等级:1

模式菌株:未知

培养方法

传代方法:将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约3min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件:37℃，5%CO2，CM1-1培养液。CM1-1培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培养液，含谷氨酰胺，含丙酮酸钠。

存储条件:冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。
鸡胚成纤维细胞培养来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

培养操作步骤：
鸡胚成纤维细胞培养1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

操作流程：
产品仅用于科研1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线

以下是公司正在在热销的产品：
THPO Protein Human 重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)DSS(分子生物学级)质量规格：分子生物学级DSS

人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810] 人内皮细胞完全培养基 100mL腺苷脱氨酶(15U/mg)质量规格：15U/mg,进口Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg

EB病毒转化的人B细胞;KMY0926匹伐他汀钙质量规格：≥98.0% 相关物质及对应异构体均小于1%Pitavastatin Calcium /NK-104

NA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 匹伐他汀钙(标准品)质量规格：HPLC≥98.0% ,标准品Pitavastatin Calcium /NK-104

GBC-SD 人细胞化钾质量规格：>99%,ARPotassium iodide
CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀钠盐质量规格：美国进口Simvastatin,  Salt

人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]6'-羟甲基辛伐他汀酸钠盐质量规格：美国进口6'-Hydroxymethyl Simvastatin Acid  Salt

FD4细胞，人细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞 小鼠,F9细胞 CM-H095人骨骼肌细胞完全培养基100mL3'-羟基辛伐他汀质量规格：美国进口3’-Hydroxy Simvastatin

P388D1(小鼠样瘤细胞) 5×106cells/瓶×2辛伐他汀酰基-β-D葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Simvastatin Acyl-β-D-glucuronide

Promocell C-27436 Preadipocyte DiffereiationMedium, 前脂肪细胞分化培养基(即用型) 500ml磺胺间甲氧嘧啶质量规格：>95%,BRSulfamonomethoxine
仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11 小鼠肠内皮细胞完全培养基 100mLB9N-二甲基琥珀酰胺酸100克USP级，98.5%

MSC, 小鼠雪旺细胞 Mouse录化苄;苄基录;录本 Bqnzyl chloridq;ω-Chlorotoluqnq;1-ChloroMqthylbqnzqnq

NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-25 Coarse 9041-35-4 100G 分离试剂

人非小细胞;NCI-H2087CG-50离子交换树脂，英文名或英文缩写：Amberlite CG-50，级别：BR，98%，规格：25克

人表皮内管皮细胞(HDLEC)(5×105)Maleicaciddiwo7ium 10g/25g/100g原装 Sigma M9009
鸡胚成纤维细胞培养CCL5 Protein Human 重组人 CCL5 / RAES 蛋白 (His & mucin 标签)氟化镍四水(>Nickel (II) fluoride tetrahydrate质量规格：>98%,BR

SK-OV-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) 二氧化硅(>99.9%,BR)Silicon (IV) oxide质量规格：>99.9%,BR

人胚;MRC-5氟化锶(>97%,BR)Strontium fluoride质量规格：>97%,BR

人上皮细胞(HBEpiC)(5×105 )丁香醛(>98%,BP)Syringaldehyde质量规格：>98%,BP

CL-0304PC-3M(人细胞)5×106cells/瓶×2四氮唑紫(>98%,BS)Tetrazolium violet质量规格：>98%,BS