人二倍体细胞/人胚说明书冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人二倍体细胞/人胚说明书
种属:2BS

形态:成纤维细胞样

模式菌株:未知

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生长特性:贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人二倍体细胞/人胚说明书的相关热销产品：
Caki-1细胞，人肾透明细胞癌细胞 绿猴猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞,RF/6A细胞 CL-0414PC-3M-IE8(人高转移细胞株)5×106cells/瓶×2法罗培南钠(标准品)质量规格：标准品用于含量测定Faropenem

CRT(人神经细胞) 5×106cells/瓶×2奥利司他质量规格：≥98.0%,BROrlistat(synthesis)

hMNC-PB-c pooledula-pure 人单核细胞，来自外周血，混合来源，超 人*微内皮细胞HCMEC甲基立枯1(分析标准品,98%)质量规格：分析标准品,98%Tolclofos-methyl

GBC-SD, 人细胞杀虫单(标准品)质量规格：分析标准品Thiosultap di

ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人细胞裂解液 (阳性对照) 绿草定(标准品)质量规格：分析标准品Triclopyr
CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株)5×106cells/瓶×2毒胡萝卜素(>95% (HPLC),BC)质量规格：>95% (HPLC),BCThapsigargin, from Thapsia garganica

PANC-1, 人*癌细胞 细胞,Hep G2细胞 U-937(组织细胞瘤细胞)硫黄素 T(>75%,BS)质量规格：>75%,BSThioflavin T

小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3硫藤黄素(>95%,BC)质量规格：>95%,BCThiolutin from Streptomyces luteosporeus

LAMP1 Others Human 人 LAMP1 / CD107a 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫堇(>90%,BS)质量规格：>90%,BSThionin

中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6四丙基化铵(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)Tetrapropylammonium Iodide
TNF Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A / Cachectin 蛋白5-溴-2-脱氧胞苷5克

人脐带平滑肌细胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐药细胞株 Human2,4-二羟基-6-甲基... 2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid,97% 480-64-8 250MG 通用试剂

人男性正常细胞;Hs68L-半胱安醋言醋盐;(R)-2-安基-3-巯基炳醋言醋盐 L-Cystqinq xy7nochloridq;L(+)-α-cMino-β-thiopropionic ccid xy7nochloridq;L(+)-cMino-α-Mqrccptopropionic ccid xy7nochloridq 7048-4-6

CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 天青II曙红100克

人输尿管上皮细胞完全培养基 100mL9000-1-5阿拉伯树胶Arabic gum
人二倍体细胞/人胚说明书615小鼠株;Ca761 小鼠子宫成纤维细胞完全培养基 100mL甘草酸Glycyrrhizic acid质量规格：UV>98%,BR

MN-h, 小鼠海马神经元 Mouse甘草酸(标准品)Glycyrrhizic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

EPHA2 Others Mouse 小鼠 EPHA2 人细胞裂解液 (阳性对照) 甘草酸单铵盐(标准品)Glycyrrhizic acid ammonium salt质量规格：HPLC≥98%，标准品

人胚肾二倍体细胞;CCC-HEK-1甘草酸单铵盐Glycyrrhizic acid ammonium salt质量规格：UV>97%,无水物,BR

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 甘草酸二铵盐（标准品）Diammonium Glycyrrhizate质量规格：UV≥98%，标准品
收到人二倍体细胞/人胚说明书处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。