恒河猴肾细胞培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　恒河猴肾细胞培养
种属:LLC-MK2

培养方法

生长特性:贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是恒河猴肾细胞培养的相关热销产品：
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1奈帕芬胺(标准品)质量规格：>99%,标准品Nepafenac

FGF9 Others Human 人 FGF9 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼卡巴嗪 质量规格：>98%Nicarbazin

KM小鼠子瘤株;U14马来酸依那普利质量规格：>98.5%,USPEnalapril Maleate

PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸依那普利（标准品）质量规格：HPLC>99%,标准品Enalapril Maleate

Caki 人肾透明细胞癌细胞氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养5-Fluorouracil
CL-0257BC-009(人癌细胞)5×106cells/瓶×29-(溴甲基)丫啶(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)9-(Bromomethyl)acridine

RP2 Others Human 人 XRP2 / RP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) DBD-COCl [=4-(N,N-二甲基氨磺酰)-7-(N-氯甲酰甲基-N-甲氨基)-2,1,3-苯并恶二唑](>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)DBD-COCl [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-2,1,3-benzoxadiazole]

人成纤维细胞cDNAHPrF cDNANBD-COCl [=4-(N-氯甲酰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑](>92.0%(T))质量规格：>92.0%(T)NBD-COCl [=4-(N-Chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole]

C6细胞，脑细胞 人肺巨细胞癌细胞,HLAmP细胞 肺大动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-(-)-扁桃酸;R-扁桃酸质量规格：>99%,BR(R)-(?)-Mandelic acid

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)1-氨基海因盐酸盐;AHD，1-氨基乙内酰脲盐酸盐质量规格：>98%,BR1-Aminohydantoin
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-赖诺普利钠盐质量规格：美国进口(R)-Lisinopril  Salt

真皮成纤维细胞完全培养基 100mL赖诺普利环己基类似物质量规格：美国进口Lisinopril Cyclohexyl Analog

WB-F344细胞，大鼠肝上皮样干细胞 HL-60(原髓细胞) 大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3洛匹那韦-d8质量规格：美国进口Lopinavir-d8

EFNA1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 标签)洛匹那韦代谢产物M-1质量规格：美国进口Lopinavir Metabolite M-1

ZR-75-1(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK-(S)-比卡鲁胺质量规格：美国进口(S)-Bicalutamide
恒河猴肾细胞培养M1 小鼠细胞癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC))Methyl decanoate质量规格：Standard for GC ,≥99.5%(GC)

PLA2G7 Others Human 人 PLA2G7 / PAFAH 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))Methyl laurate质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

人胚胎肌肉组织来源细胞;CCC-HSM-2棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC))Methyl palmitate质量规格：Standard for GC,≥98.0%(GC)

FUT8 Others Human 人 FUT8 (aa 68-575) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Methyl salicylate质量规格：standard for GC,≥99.5%(GC)

VERO细胞衍生株;SVP油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC))Methyl oleate质量规格：Standard for GC,≥99%(GC)
收到恒河猴肾细胞培养处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。