资源名称　小鼠脑微内皮细胞产品仅用于科研
种属：MBMEC

类型：贴壁

分离基物：脑微；内皮细胞

安全等级：1

模式：菌株未知

培养方法

培养基：H-DMEM，90%；FBS，10%；双抗

生长条件：Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存储条件：Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%（for reference） Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
小鼠脑微内皮细胞说明书来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

培养操作步骤：
小鼠脑微内皮细胞说明书1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

操作流程：
产品仅用于科研1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线

以下是公司正在在热销的产品：
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食管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)阿替洛尔质量规格：度大于98%,USPgradeAtenolol

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HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 青霉素G钠盐质量规格：>1500U/mg,USP,BRPenicillin G,  salt

大鼠颗粒细胞RGC青霉素G钠(标准品)质量规格：效价测定Penicillin G,  salt

NCI-H1703[H1703]细胞，人细胞 人细胞,5637(HTB-9)细胞 人视网膜色素上皮细胞HRPEpiC米格列奈钙质量规格：>99%,BRMitiglinide calcium Hydrate
豚鼠皮肤细胞;GP-S1N-去甲酰-N-苄氧羰基奥利司他质量规格：美国进口N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人细胞裂解液 (阳性对照) (2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羟基十六烷酸(奥利司他杂质)质量规格：美国进口(2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity)

JF305 *癌C17鞘氨醇质量规格：美国进口C17 Sphingosine

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CTF1 Protein Human 重组人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白草酸亚锡(>质量规格：>98%,BRTin (II) oxalate
小鼠脑微内皮细胞说明书GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 钌标准溶液(1000μg/ml,介质：2.0mol/L HCl)Ruthenium solution质量规格：1000μg/ml,介质：2.0mol/L HCl

293A，人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别)铑标准溶液(1000μg/ml,溶剂:2.0Mol/L HCl)Rhodium solution质量规格：1000μg/ml,溶剂:2.0Mol/L HCl

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EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人细胞裂解液 (阳性对照) 银标准溶液(1000μg/ml)Silver standard质量规格：1000μg/ml