资源名称　人肾母细胞瘤细胞产品仅用于科研
种属：SK-NEP-1

类型：半贴壁生长

形态：CM5-1培养液中，半贴壁，不规则型，有圆形、短梭性

分离基物：肾，肋膜渗出液

提供形式：复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。

安全等级：1

模式：菌株未知

应用领域微结构有少许微绒毛，连接复合物，形态：完整的高尔基体，内质网多为光滑型，脂滴，没有病毒棵粒。

培养方法

传代方法：将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，无需使用胰酶消化，直接加入 12mL（/100mm 皿）培养液，用吸管吹打细胞至完全脱 落，轻轻吹打均匀，可分 3~6 皿培养。

生长条件：37℃，5%CO2，CM5-1培养液。CM5-1培养液：85%McCoy’s 5a+15%FBS。McCoy’s 5a：MC’5A培养基：，含谷氨酰胺。

存储条件：冻存则将细胞转移至离心管中，(110g，3min)离心，离心完成后用 6mL 冻存液（90%FBS+10%DMSO）重悬细胞，吹打均匀，分为 6 支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。
人肾母细胞瘤细胞说明书来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

培养操作步骤：
人肾母细胞瘤细胞说明书1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

操作流程：
产品仅用于科研1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线

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人脉络丝成纤维细胞 (HCPF)( 5×105 )盐酸多柔比星/盐酸阿霉素质量规格：>98%,BRDoxorubicin HCl/Adriamycin

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人色素瘤细胞;A875 大鼠肠上皮细胞完全培养基 100mL盐酸丁卡因（标准品）质量规格：HPLC法含量测定Tetracaine HCl

DH82 狗肾恶性症细胞苯甲唑啉盐酸盐/盐酸妥拉唑林质量规格：>98%,进口原装Tolazoline HCl

CD19 Others Human 人 CD19 / Leu-12 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸托特罗定质量规格：>98.5%,M受体(毒蕈碱型乙酰胆碱受体)拮抗剂Tolterodine Tartrate
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CL-0329Chang liver (CCL13) (人张氏肝细胞)5×106cells/瓶×2L-谷氨酸-α-苄酯质量规格：>98%,BRL-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester

CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 人细胞裂解液 (阳性对照) L-亮氨酸乙酯盐酸盐质量规格：>98%H-Leu-OEt·HCl

小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mLL-苯丙氨酸质量规格：>99%,BRL-Phenylalanine

Psi2 DAP小鼠胚胎成纤维细胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培养基+10%FBSL-天冬酰胺;L-天冬酰一水  质量规格：>99%,BR,一水L-Asparagine Monohydrate
人小梁网细胞HTMC2-(羟甲基)-15-冠5-(>96.0%(GC))质量规格：>96.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether

CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-(羟甲基)-18-冠6-(>93.0%(GC))质量规格：>93.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether

HMF 人肌肉组织来源细胞1,4,8,11-四氮杂环十四烷(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane

CM-R019大鼠腮腺细胞完全培养基100mL1,4,7-三氮杂环壬烷三盐酸盐(>98.0%(N)(T))质量规格：>98.0%(N)(T)1,4,7-Triazacyclononane Tri

RBE, 人肝细胞2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-yl)乙醇-d4质量规格：美国进口2-(6-Amino-9H-purin-9-yl)ethanol-d4
人肾母细胞瘤细胞说明书人表皮色素细胞-浅色素(HEM)( 5×105 )1酸二氢钠一水(ACS级) phosphate, monobasic, monohydrate质量规格：ACS级,>98.5%

人绒毛间充质成纤维细胞葡萄糖酸钙Calcium gluconate, hydrate质量规格：>99%

人胎盘绒膜癌细胞;BeWo 大鼠膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL十二烷基-β-D-麦芽糖苷;月桂酰基麦芽糖苷N-Dodecyl-b-maltoside质量规格：>99%,分子生物学级

N-H 小鼠细胞盐酸氨基脲Aminourea 质量规格：>98%,BR

TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸链霉素灭菌溶液，30 mg/mlStreptomycin sulfate solution, 30 mg/ml质量规格：Sterile灭菌溶液,30mg/ml