细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
大鼠肺泡Ⅱ型细胞说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　大鼠肺泡Ⅱ型细胞说明书
种属：RLE-6TN

类型：贴壁

形态：CM1-1培养液中，贴壁，上皮样细胞，长梭形，圆形

提供形式：复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。

安全等级：1

模式：菌株未知

培养方法

传代方法：将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约3min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件：37℃，5%CO2，CM2-1培养液。CM2-1培养液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培养液，含谷氨酰胺。

存储条件：冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到大鼠肺泡Ⅱ型细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是大鼠肺泡Ⅱ型细胞说明书的相关热销产品：
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 肾上腺皮质瘤细胞,SW 13细胞 TT(人细胞)D-虫荧光素钠盐;D-荧光素钠盐质量规格：>98%D-Luciferin  salt

小鼠小胶质细胞;BV22ˊ,7ˊ-二氯荧光素钠盐质量规格：>98%2',7'-Dichlorofluorescein  Salt

MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸酪胺质量规格：>97%,BRTyramine

大鼠细胞;CBRH-7919 [CBRH7919]糠酸(>97%，BR)质量规格：>97%，BR2-Furoic acid

SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-甲基咪唑(>质量规格：>98%,BR2-Methylimidazole
HA Others H5N8 甲型 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) HistoChoiceDermatologyFixative切片固定剂25克3N

ACHN, 人肾细胞腺癌细胞1,4-二羌基醌;1,4-二羌基-9,10-二同 1,4-Dixy7noxycnthrcinoneonq;inoneizcrin;C.I.58050 81-64-1

GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-溴巴豆醋酯 Mqthyl 4-bromocrotonctq 1117-71-1

Sars结构蛋白表达株;293sars181AFluconazole大扶康5KUBR

SW579细胞，人细胞 人细胞系,HNE2-LMP1细胞 CL-0363Hs68(人男性正常细胞)5×106cells/瓶×2604-59-1β-黄酮;5,6-本并黄酮β-Naphthoflavone;5,6-Benzoflavone;
L6细胞，大鼠成肌细胞 人低转移细胞,MHCC97-L细胞 CL-0120HuH-7(人细胞)5×106cells/瓶×2MOPSOFREEACIDMOPSO超级100G68399-77-9RT

中国仓鼠卵巢细胞;CHO一水草醋铵 cmmonium oxclctq monohydrctq 6009-70-7

SCARB2 Others Human 人 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人细胞裂解液 (阳性对照) Invertase果糖苷酶10克超，99%

气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)赤霉素GA3500克

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照) (Bovine)
大鼠肺泡Ⅱ型细胞说明书小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH3 小鼠肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL灵芝醛A(标准品)Ganoderal A质量规格：HPLC≥95%,标准品

MN-h, 小鼠海马神经元 Mouse阿司咪唑(标准品)Astemizole质量规格：含量测定

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人细胞裂解液 (阳性对照) 伊屈泼帕;艾曲波帕Eltrombopag (SB-497115)质量规格：>99%,血小板生成素受体激动剂

人细胞;MGC-803辣椒平Capsazepine质量规格：>98%,美国进口

PIK3IP1 Others Human 人 PIK3IP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸阿米洛利Amiloride  质量规格：>98.5%,水合物