人氟尿嘧啶耐药株形态冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人氟尿嘧啶耐药株形态
种属：HCT-8/FU

类型：贴壁

安全等级：1

模式：菌株未知

培养方法

培养基：1640+10%FBS +1ug/ml 5-fu

传代方法：1:2-1:4，2天换液

存储条件：细胞库无血清培养基：
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人氟尿嘧啶耐药株形态的相关热销产品：
CRP Others Human 人 CRP / C-Reactive Protein 人细胞裂解液 (阳性对照) 异香草醛(>质量规格：>98%,BRIsovanillin

AsPC-1 人转移*腺癌细胞异香草醛(标准品)质量规格：>99%,标准品Isovanillin

HuH-6人肝母细胞瘤细胞 HuH-6 human hepatoblastoma cell DMEM+10% FBS氧化镧(>99%,EP)质量规格：>99%,EPLanthanum(III) oxide

BMP2 Protein Danio rerio (zebrafish) 重组斑马鱼 BMP-2 / BMP2A 蛋白氯化镁六水(分子生物学)质量规格：>99%,分子生物学级Magnesium chloride, hexahydrate

人*上皮细胞(HREpiC)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse醋酸锰四水质量规格：>98%,BCManganese (II) acetate, tetrahydrate
HeLa229细胞，人细胞(HPV-18永生化细胞) 小鼠细胞,GT1-1细胞 真皮成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)TAE684质量规格：>98%,选择性的ALK抑制剂NVP-TAE684

HBE(人上皮样细胞) 5×106cells/瓶×2青蒿酸(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Artemisic acid

hMSC-AT Pellet 人体脂肪组织的间质干细胞团块 > 1 mio.cells 人肾皮质上皮细胞总RNAHRCEpiC NA链霉亲和素质量规格：>15Units/mg proteinStreptavidin from Streptomyces avidinii

CM-M089小鼠皮肤肥大细胞完全培养基100mL西他沙星质量规格：>98.5%,水合物,BRSitafloxacin Hydrate

HFE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) DHBS；3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠质量规格：>99%DHBS
SVEC4-10(小鼠结内皮细胞) 5×106cells/瓶×2奥美拉唑N-氧化物质量规格：美国进口Omeprazole N-Oxide

HDLEC-c adult 人类皮肤管内皮细胞(HDLEC)来自成年捐献者 500,000cells 颌下腺上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)4-去甲氧基-4-硝基奥美拉唑硫化物质量规格：美国进口4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole Sulfide

视网膜微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)5-羟基奥美拉唑钠盐质量规格：美国进口5-Hydroxy Omeprazole  Salt

GPA33 Others Human 人 GPA33 / Glycoprotein-A33 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-O-去甲基奥美拉唑硫化物质量规格：美国进口5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide

NRK 大鼠肾细胞奥氮平内酰胺杂质质量规格：美国进口Olanzapine Lactam Impurity
人氟尿嘧啶耐药株形态CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸粘杆菌素(标准品)Colistin Sulphate质量规格：效价测定

HMF 人肌肉组织来源细胞盐酸依氟鸟氨酸Eflornithine HCl质量规格：>98%,水合物

CM-R019大鼠腮腺细胞完全培养基100mL色甘酸钠Cromolyn 质量规格：>99%,USP32,BR,可用于细胞培养

RBE, 人肝细胞色甘酸钠（标准品）Cromolyn 质量规格：HPLC>98%,标准品

EB病毒转化的人B细胞;KMY1022 人神经星形胶质细胞完全培养基 100mL环孢菌素,环孢素A,环孢霉素ACyclosporine A质量规格：>98.5%,BR，可用于细胞培养
收到人氟尿嘧啶耐药株形态处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。