正常食管细胞株形态冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　正常食管细胞株形态
种属：HEEpic

类型：贴壁生长

分离基物：人，食管；上皮细胞

模式：菌株未知

培养方法

培养基：1640，90%；FBS，10%；双抗

生长条件：Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存储条件：Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%（for reference） Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是正常食管细胞株形态的相关热销产品：
SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞 低转移细胞,96-C细胞 PLC/PRF/5(亚力山大细胞)槲皮素 质量规格：HPLC>85%,二水BRQuercetin dihydrate

小鼠细胞;Fox-NY槲皮素(标准品）质量规格：HPLC>98.0%,标准品Quercetin

PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人细胞裂解液 (阳性对照) 铕标准溶液（1000μg/ml）质量规格：1000μg/ml Eur standard

大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5氟离子（F-）标准溶液（500mg/L,溶剂：水）质量规格：500mg/L,溶剂：水 Fluoride standard

CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氟离子（F-）标准溶液（1000mg/L,基体:水）质量规格：1000mg/L,基体:水 Fluoride standard
HUVEC-c pooled 混合来源的人脐内皮细胞(HUVEC) 500,000cells 肠粘膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)尼莫地平-d7质量规格：美国进口Nimodipine-d7

原代平滑肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml奥洛他定N氧化物质量规格：美国进口Olopatadine N-Oxide

LYN Others Human 人 Lyn Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 奥洛他定盐酸盐-d6质量规格：美国进口Olopatadine-d6

EB病毒转化的人B细胞;KMY0906外消旋去乙基奥昔布宁盐酸盐质量规格：美国进口rac Desethyl Oxybutynin

CFPAC-1细胞，*癌细胞 细胞系,SUNE-1亚株-5-8F细胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞)5×106cells/瓶×2羟基匹格列酮（M-Ⅱ）（非对映）质量规格：美国进口Hydroxy Pioglitazone (M-II) (Mixture of Diastereomers)
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溶菌酶(蛋清)25克RT

人关节软骨细胞完全培养基 100mL邻拂录苄 clphc-Chloro-o-fluorotoluqnq 342-32-7

Vero细胞，绿猴肾细胞 RSC96(大鼠雪旺细胞) 小鼠瘤株;S180(R)-3-羌基-4，4-二基-二轻-2(3H)-同 D-(-)-PcNTOLcCTONq 299-04-

EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白AEC3-基-N-乙基25克AR，98%

U-937(人组织细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;EL4139-33-3四乙酸二钠etxylenedinitnilotetraacetic acid diwo7ium salt dihydrate
正常食管细胞株形态中国仓鼠卵巢细胞;CHO 癌细胞，ZR-75-30细胞 SVP细胞，VERO衍生株氯普噻吨Chlorprothixene质量规格：>98%,BR

人胚肾细胞;293 [HEK-293]咪唑（标准品）Imidazole质量规格：检查

HA Others H6N1 甲型 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 瑞他帕林;瑞他莫林Retapamulin质量规格：>99%,BR

人星形胶质细胞HA乳果糖（标准品）Lactulose质量规格：含量测定

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞丁安（标准品）FTIBAMZONE质量规格：UV法含量测定
收到正常食管细胞株形态处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。