培养操作步骤：
小鼠胚胎成纤维细胞 1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。产品仅用于科研 

资源名称　小鼠胚胎成纤维细胞
种属：BALB/3T3 clone A31

类型：贴壁生长

形态：成纤维细胞样

分离基物：BALB/3T3 clone A31细胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年从裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的几株细胞之一

安全等级：1

模式：菌株未知

应用领域BALB/3T3 clone A31细胞对接触抑制特别敏感，生长需高倍数稀释，饱和浓度低。此外，BALB/3T3 clone A31细胞对癌基因DNA病毒SV40和小鼠病毒高度易感。

培养方法

培养基：DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S

生长条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是公司正在在热销的产品：
人B细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)1,4-二氨基蒽醌(>90%,BS)1,4-Diaminoanthraquinone质量规格：>90%,BS

CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,4-二羟基蒽醌(>96%,BR)1,4-Dihydroxyanthraquinone质量规格：>96%,BR

非洲绿猴肾细胞;VERO-761,3-二氨基胍盐酸盐 1,3-Diaminoguanidine Mono质量规格：>98%

KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3,5-二-L-甲状腺素,3,5-二甲腺原氨酸3,5-diiodo-L-thyronine质量规格：>99%,BR

CL-0201S-180(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2短叶素(标准品)Pinobanksin质量规格：HPLC≥98%,标准品
IL6 Protein Mouse 重组小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白(-)-莨菪碱,L-天仙子胺，澳洲毒茄碱(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品(-)-Hyoscyamine

Romas(人瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(人二倍体胚肺细胞)葡聚糖D70/右旋糖苷质量规格：Mw:63000~77000,USP32Dextran D70

CL-0124IMR-32(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2右旋糖苷/葡聚糖D40质量规格：Mw35 000 to 45 000Dextran D40

TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖D20/右旋糖苷质量规格：MW:16000~24000Dextran D20

人肠平滑肌细胞裂解物HISMCL (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol
人永生化细胞;CNLMG-B5538LC 人肝动脉平滑肌细胞完全培养基 100mLTributylphosphite亚嶙酸正丁酯100克BR，97%

人绒毛间叶成纤维细胞RNAHVMF miRNA5 μg本同;基本基同;酰本 ccqtophqnonq;Mqthyl phqnyl kqtonq;BqnzoylMqthcnq;Hypnonq;Phqnylqthcnonq;ccqtylbqnzqnq 98-86-

SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分离试剂

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7Span40司班401公斤BR

CW-2细胞，腺癌细胞 皮肤T细胞瘤,Hut-78细胞 人成细胞;MG-63GlycogenTypeIII 100mg/500mg/1g原装 Sigma G8876
小鼠胚胎成纤维细胞 小鼠成纤维细胞(EGFP标记)木栓酮（标准品）FRIEDELIN质量规格：鉴别

人男性正常细胞;Hs68 人粘膜上皮细胞完全培养基 100mL表木栓醇（标准品）FRIEDELAN-3BETA-OL质量规格：鉴别

人真皮成纤维细胞-裂解物HDF-a L老龙皮酸；网脊衣酸 A（标准品）(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid质量规格：鉴别用

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照) 焦性没食子酸（标准品）Pyrogallol质量规格：含量测定

人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]正十九烷（标准品） N-NONADECANE 质量规格：内标
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。产品仅用于科研
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
小鼠胚胎成纤维细胞 来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。