细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
人低分化说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人低分化说明书
种属：GLC-82[GLC82]

形态：上皮细胞样

培养方法

培养基：RPMI1640(w/oHepes)10%FBS　

传代方法：1:5~1:10传代，建议初始浓度为2~4×104cells/cm2；2~3天换液1次。　

生长特性：贴壁生长　

存储条件：基础培养基：+5%DMSO+20%FBS

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人低分化说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人低分化说明书的相关热销产品：
人毛发基质细胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞 Mouse6-苄氧基华法林6-Benzyloxy Warfarin质量规格：美国进口

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A奥美沙坦酸Olmesartan Acid质量规格：美国进口

人骨骼肌细胞 (HSkMC)( 5×105 )10-姜酚（标准品）10-Gingerol质量规格：HPLC≥98%，标准品

CL-0243WI-38(人胚肺细胞)5×106cells/瓶×26-姜酚（标准品）6-gingerol质量规格：HPLC≥98%，标准品

人导管癌细胞;ZR-75-30 大鼠脑平滑肌细胞完全培养基 100mL8-姜酚（标准品）8-Gingerol质量规格：HPLC≥98%，标准品
Ke-3 人细胞外消旋马来酸噻吗洛尔质量规格：美国进口rac Timolol Maleate

MDA-MB-436人腺癌细胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培养基+10%FBS(R)-(+)-马来酸噻吗洛尔质量规格：美国进口(R)-(+)-Timolol Maleate

FAM3C Protein Human 重组人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 标签)(S)-(-)-马来酸噻吗洛尔质量规格：美国进口(S)-(-)-Timolol Maleate

小鼠雪旺细胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌细胞 Human替硝唑标记d4质量规格：美国进口Tinidazole Labeled d4

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系*);CHO-K1外消旋α-羟基布洛芬质量规格：美国进口rac α-Hydroxy Ibuprofen
大鼠癌细胞;SHZ-889-芴甲基-N-琥珀酰亚基碳酸酯，英文名或英文缩写：FMOC-OSU，级别：BR，99%，规格：10克

BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人细胞裂解液 (阳性对照) α-L-岩藻糖苷酶 α-L-Fucosidase (1.8u/mg) 9037-65-4 1U 通用试剂

人膀胱基质成纤维细胞总RNAHBdSF NA加醋-D FORMIC cCID C-D 917-71-2

ATF2 Others Human 人 ATF2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Chloroauricacidhydrated四水合录金酸5毫克基准试剂，99.95%

中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO Hu 164 SCF 17(L-丝酸)
人低分化说明书ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼泊金乙酯Ethyl Paraben质量规格：美国进口

人真皮微内皮细胞-HDMEC四环素1酸复盐Tetracycline phosphate complex质量规格：美国进口

TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人细胞裂解液 (阳性对照) 四环素Tetracycline质量规格：进分

犬肾细胞系/IgR;MDCK/IgR4-盐酸差向四环素4-Epitetracycline 质量规格：美国进口

95-D细胞，人高转移细胞 转血小板基因仓鼠卵巢细胞,CHO-pt细胞 CM-M018小鼠颌下腺上皮细胞完全培养基100mL