细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
人肺扁平上皮癌细胞培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人肺扁平上皮癌细胞培养
种属：QG-56

类型：肺，扁平上皮癌

形态：***

培养方法

培养基：RPMI-1640(GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人肺扁平上皮癌细胞培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人肺扁平上皮癌细胞培养的相关热销产品：
肺大平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)22-二十三碳1酸(>95.0%(GC)(T))22-Tricosenoic Acid质量规格：>95.0%(GC)(T)

CLCF1 Others Human 人 N1 / CLCF1 / CLC 人细胞裂解液 (阳性对照) 10-十一碳炔酸(>95.0%(T))10-Undecynoic Acid质量规格：>95.0%(T)

人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431]1-PP1萘1-Naphthyl PP1质量规格：99%，santa进口原装sc-203765

豚鼠皮肤细胞;GP-S2 恒河猴肾细胞，LLC-MK2细胞 WEHI-3细胞，小鼠血细胞阿利克仑半富马酸盐Aliskiren hemifumarate质量规格：>98%,BR

人羊膜细胞;WISH埃博霉素 DEpothilone D质量规格：>98%,BR细胞培养级
LIF Protein Human 重组人 LIF 蛋白 (Fc 标签)乙醇酸钠(>质量规格：>98%,BR  glycolate

RK1(大鼠肾细胞) 5×106cells/瓶×2 786-0(肾透明细胞腺癌)司班60质量规格：BRSpan* 60

CL-0164NAMALWA(人Butt's瘤细胞)5×106cells/瓶×2二氧化钛(>99%,BR)质量规格：>99%,BRTitanium (IV) oxide

CD84 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲拉通X-405(69.0~71.0%)质量规格：69.0~71.0%,Biotech GradeTriton X-405

人*成纤维细胞-心室裂解物HCF-av L2,4,6-三(五氟乙基)-1,3,5-三嗪(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine
F11R Others Mouse 小鼠 F11R / JAM-A / JAM-1 人细胞裂解液 (阳性对照) PrismProteinMarkerPrism 蛋白Marker生物技术级深蓝至紫色粘稠液体FROZENsigma

人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17丽丝胺罗丹明B Sulforhodamine B  salt 3520-42-1 5G 通用试剂

人毛发干细胞(HHDPC)( 5×105 )染料木苷 Gqnistin 29-29-9

人脐平滑肌细胞FORMALDEHYDE,37%SOLUTION,37%溶液蛋白组学级透明液体RT不sigma

急性T细胞细胞;TALL-104 大鼠心肌细胞完全培养基 100mL123-66-0己酸乙酯etxyl hexanoate;Hexanoic acid etxyl ester;etxyl n-hexoate;etxyl caproate
人肺扁平上皮癌细胞培养人正常上皮细胞;RWPE-1尿酸(标准品)Uric acid质量规格：HPLC>99%,标准品

人肺动脉内皮细胞(HPAEC) ( 5×105 )度米芬Domiphen bromide质量规格：>98%,AR

CL-0333E.G7-OVA(小鼠T瘤细胞)5×106cells/瓶×2甜菜碱，一水Betaine monohydrate质量规格：>99%,BR

人导管癌细胞;HCC38 大鼠关节软骨细胞完全培养基 100mL萘酚AS-D-乙酸酯Naphthol AS-D acetate质量规格：0.98

H22 小鼠细胞锌原卟啉 protoporphyrin质量规格：进分