乳酸乳球菌组成型表达质粒培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　乳酸乳球菌组成型表达质粒培养
种属：pMG36e

提供形式：20μl

模式：菌株未知

培养方法

传代方法：收到质粒后请短暂离心，取2μl转化至对应感受态中，挑取单*重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请联系QQ客服查询。
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是乳酸乳球菌组成型表达质粒培养的相关热销产品：
WISH(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×21,4,8,11-四氮杂环十四烷(>98.0%(T))1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane质量规格：>98.0%(T)

HCASMC-c 人平滑肌细胞(HCASMC) 500,000cells 小肠隐窝上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1,4,7-三氮杂环壬烷三盐酸盐(>98.0%(N)(T))1,4,7-Triazacyclononane Tri质量规格：>98.0%(N)(T)

肝窦内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-yl)乙醇-d42-(6-Amino-9H-purin-9-yl)ethanol-d4质量规格：美国进口

CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人细胞裂解液 (阳性对照) N-6-(δ2-异戊1基)-腺嘌呤N-6-(δ2-Isopentenyl)-adenine质量规格：美国进口

大鼠骨骼肌细胞完全培养基 100mL9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine质量规格：美国进口
MCF 7B(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼仓鼠肾细胞)21-辛酸酯质量规格：美国进口Hydrocortisone 21-caprylate

原代神经胶质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml21-半琥珀酸钠盐质量规格：美国进口Hydrocortisone 21-hemisuccinate  salt

SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-(O-羧甲基)1质量规格：美国进口Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime

大鼠子宫颈上皮细胞完全培养基 100mL21-半琥珀酸酯质量规格：美国进口Hydrocortisone 21-hemisuccinate

Reh人急性非B非T细胞 Reh human acute non B non T lymphocytic leukemia IMDM培养基(GIBCO)+10%FBS氢化大豆卵1脂;氢化卵1脂质量规格：>95%,BRHSPC;Lecithins Hydrogenated
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人细胞裂解液 (阳性对照) NEXTGEL7.5%ACRYLAMIDESOLNPROTNNEXT GEL 7.5%蛋白组学级500MLRT

人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL(1S)-(-)-莰烷酰录 (-)-Ccmphcnic ccid chloridq 39637-74-6

SAC-II B2细胞，小鼠腹水瘤细胞 BRL 3A(大鼠肝细胞) 人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1洛伐他汀相关物质A Lovcstctin Rqlctqd CoMpound c;dixy7no-lovcstctin 77217-9-4

CCL11 Protein Human 重组人 CCL11 蛋白 (His 标签)INDOXYL-B-DGLUCOSIDE吲哚-beta-D-葡萄糖苷100MGFROZEN

RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人细胞裂解液 (阳性对照) N-芴甲氧羰酰基-D-本酸NA
乳酸乳球菌组成型表达质粒培养HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 Human培哚普利酰基-α-D-葡萄糖苷酸Perindopril Acyl-α-D-glucuronide质量规格：美国进口

MEP1A Others Human 人 MEP1A / PPHA 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利酰基-β-D-葡萄糖苷酸Perindopril Acyl-β-D-glucuronide质量规格：美国进口

人主动脉内皮细胞裂解物HAECL匹伐他汀内酯Pitavastatin Lactone质量规格：美国进口

TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人细胞裂解液 (阳性对照) 哌唑嗪Prazosin质量规格：美国进口

C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK-哌唑嗪-d8Prazosin-d8质量规格：美国进口
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产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。