人细胞（2014年9月新引进）（干细胞库保藏）形态冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人细胞（2014年9月新引进）（干细胞库保藏）形态
种属：TCCSUP

类型：膀胱

形态：上皮样

培养方法

培养基：EMEM (Invitrogen，11090081) 87 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml Glutamax（invitrogen 35050） 1 ml Non-essential Amino Acids, 100 (Invitrogen, 11140) 1 ml Sodium Pyruvate 100 mM Solution（invitrogen 11360070） 1 ml 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人细胞（2014年9月新引进）（干细胞库保藏）形态的相关热销产品：
人口腔角质细胞(HOK)( 5×105 ) NSC，大鼠神经干细胞 Rattus9-(2-羟丙基-d6)腺嘌呤9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine质量规格：美国进口

猴肾细胞;Vero IgCD4(R)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine质量规格：美国进口

FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-1酸甘油酸激酶3-Phosphoglyceric Phosphokinase质量规格：1000u/mg,Sigma分装

HPB-ALL(悬浮) T细胞1,5-二1酸-D-核酮糖/1,5二1酸核酮糖d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP质量规格：90.0%,Sigma

769-P人肾细胞腺癌细胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸性蛋白酶；蛋白酶来自佐氏曲霉Acidic Protease from Aspergillus 质量规格：BR,50u/mg
OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人细胞裂解液 (阳性对照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )质量规格：D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6

CM-H053人细胞完全培养基100mL氘代DMSO-D6(10 g )质量规格：D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6

DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人细胞裂解液 (阳性对照) 蛋白酶K(进分)质量规格：≥30units/mg protein,sigma分装Proteinase K

人海马星形胶质细胞HA-h蛋白酶K(Sigma)质量规格：≥30units/mg protein,sigma原装Proteinase K

Hs 181.Tes细胞，正常人细胞 人癌细胞,HCC1937细胞 平滑肌细胞培养基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制剂质量规格：进分Chymostatin
人脂肪微内皮细胞HAMEC抗坏血酸；维生素C质量规格：AR;>99%Ascorbic acid；vitamin C

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素C(标准品)质量规格：含量测定Ascorbic acid；vitamin C

非洲绿猴肾细胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺质量规格：AROctadecanamine

NCI-H157细胞，人非小细胞 小鼠细胞,S-180细胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL山梨酸质量规格：AR,99%Sorbic acid

RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞细胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇质量规格：HPLC≥98%，标准品DL-Menthol
人细胞（2014年9月新引进）（干细胞库保藏）形态HBE(人上皮样细胞) 5×106cells/瓶×2 软骨细胞培养基CM去噻唑基甲基 利托那韦Desthiazolylmethyl Ritonavir质量规格：美国进口

肾动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)N-去甲基罗格列酮-d4N-Desmethyl Rosiglitazone-d4质量规格：美国进口

RPRD1B Others Human 人 RPRD1B 人细胞裂解液 (阳性对照) 罗格列酮（钾盐）Rosiglitazone (potassium salt)质量规格：美国进口

小鼠腹水瘤细胞;S-180罗格列酮盐酸盐rosiglitazone 质量规格：美国进口

HPAEC细胞，人肺动脉内皮细胞 猴肾细胞系,BSC-1细胞 CL-0082F9(小鼠)5×106cells/瓶×25-羟基罗格列酮5-Hydroxy Rosiglitazone质量规格：美国进口
收到人细胞（2014年9月新引进）（干细胞库保藏）形态处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。