人胎盘绒膜癌细胞培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人胎盘绒膜癌细胞培养
种属：BeWo

形态：上皮细胞样

培养方法

培养基：F12K10%FBS　

生长特性：贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人胎盘绒膜癌细胞培养的相关热销产品：
角质细胞生长添加物KGS(S)-(-)-5'-苄氧基苯基卡维地洛(S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol质量规格：美国进口

CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-(+)-O-去甲卡维地洛(R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol质量规格：美国进口

大鼠气管上皮细胞完全培养基 100mL5-甲基吲哚(>5-Methylindole质量规格：>98%,BR

CRFK细胞，猫肾细胞 SK-HEP-1(人细胞) 猕猴肺细胞;MML25-硝基愈创木酚(植物激素级)5-Nitroguaiacol质量规格：>98%,植物激素级

NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 标签)6-溴-2-萘酚(>6-Bromo-2-naphthol质量规格：>98%,BR
RIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2ALKALINEPHOSPHATASE,2-COMPONENTSYSTEMS碱性嶙酸酶(含酶及稀释液)生物技术级COLDsigma

F9(小鼠) 5×106cells/瓶×2 CL-0290MDA-MB-468(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 犬肾细胞系/IgR;MDCK/IgR顺,顺-1,5-环忻二1 ≥98.0% (GC) 1,5-CYCLOOCTcDIqNq 122-1-1

615小鼠树突状细胞瘤株;DCS溴醋酯;溴醋醋酯 Mqthyl broMoccqtctq 96-3-

CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氧化金500毫升RT

CM-M033小鼠肝实质细胞完全培养基100mL71-23-81-1-Propanol; Propanol; Alcohol C3;
小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)噻乙酸，英文名或英文缩写：2-Aminothiazol-4-acetic acid，级别：USP级，1603u/mg，规格：10KU

H9c2细胞，大鼠心肌细胞 人细胞,HepG2/2-15细胞 CL-0128JeKo-1(人套细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×23-(癸基二基铵)炳烷-1-磺醋内盐 3-(Dqcyldimqthylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12163-36-7

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-GLYCEROL甘油蛋白组学级无色至几乎无色粘稠液体RTsigma

CD38 Others Human 人 CD38 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺丁基-β-环糊精，英文名或英文缩写：Sulfobutyl-β-Cyclodextrin，级别：高，98%，规格：500U

破骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)3240-34-4二乙酰氧基本(Diacetoxyiodo)benzene
人胎盘绒膜癌细胞培养兔间变表皮鳞株;VX21丙基-β-D-吡喃半乳糖苷ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE质量规格：>98%,BR

人上皮细胞(HPEpiC)(5×105)2-氨基环乙醇2-Aminocyclohexanol  质量规格：>98%,日本原装进口

CL-0131KB(人口腔表皮样癌细胞)5×106cells/瓶×2Y-27632.2HClY27632质量规格：>98%,ROCK1(p160ROCK) 选择性抑制剂

人非小细胞细胞;NCI-H23 大鼠视网膜muller细胞 100mL灵芝酸A(标准品)Ganoderic acid A质量规格：HPLC≥95%，标准品

A549/DDP 肺腺癌/顺铂耐药株蝙蝠葛苏林碱(标准品)Daurisoline质量规格：≥96%，标准品
收到人胎盘绒膜癌细胞培养处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。