细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
人膀胱移行细胞癌细胞培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人膀胱移行细胞癌细胞培养
种属：T24

形态：上皮细胞样

培养方法

培养基：MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS　

生长特性：贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人膀胱移行细胞癌细胞培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人膀胱移行细胞癌细胞培养的相关热销产品：
间充质干细胞成骨细胞分化生长添加物MODS杯[6]芳烃(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene质量规格：>95.0%(HPLC)

IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-叔丁基杯[6]芳烃(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)质量规格：>98.0%(HPLC)

人牙周膜成纤维细胞完全培养基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫杂杯[4]芳烃(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene质量规格：>94.0%(HPLC)

T6-Swiss albino细胞，小鼠胚胎成纤维细胞 B16(小鼠色素瘤细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫杂[4]芳烃钠盐(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene  Salt质量规格：>98.0%(HPLC)
PLC/PRF/5(人亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)Boc-L-beta-谷氨酸5-苄酯质量规格：0.98Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl ester

CL-0236U-2 OS(人细胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯质量规格：>98%,BRFmoc-β-homoaspartic acid

IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯质量规格：0.98Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester

人肺动脉成纤维细胞cDNAHPAF cDNA高精氨酸质量规格：98%，BR，L型H-HomoArg-OH

HCC38细胞，人导管癌细胞 昆虫细胞系,SF-9细胞 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)BOC-D-缬氨酸质量规格：>98%,BRBoc-D-Val-OH
人*上皮细胞HREpiC4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸 质量规格：美国进口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 人细胞裂解液 (阳性对照) S(-)-盐酸心得安质量规格：美国进口S(-)-Propranolol ? HCl

IEC-6 大鼠小肠引窝上皮细胞雷洛昔芬-d4质量规格：美国进口Raloxifene-d4

CM-H115人脑动脉内皮细胞完全培养基100mL雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Raloxifene 6-Glucuronide

U266B1 [U266], 人细胞(+)-儿茶素水合物质量规格：HPLC>98%,进分(+)-Catechin hydrate
人膀胱移行细胞癌细胞培养输尿管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH质量规格：>98%,BR

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人细胞裂解液 (阳性对照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH质量规格：>99%,BR

大鼠气管上皮细胞;RTEBOC-L-丝氨酸甲酯Boc-Ser-OMe质量规格：BR

PG49细胞，人系 转S9基因仓鼠卵巢细胞,ZA1细胞 CL-0042BxPC-3(人原位*腺癌细胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-苄基-L-丝氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine质量规格：0.98

SVEC4-10(小鼠结内皮细胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-苏氨酸Boc-Thr-OH质量规格：>98%,BR