培养操作步骤：
人永生化角质形成细胞培养1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

资源名称　人永生化角质形成细胞
种属:Hacat

类型:贴壁

形态:上皮细胞样

分离基物:Hacat细胞源自一位62岁患有男性的病灶外围正常皮肤

安全等级:1

模式菌株:未知

应用领域:Hacat细胞角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。

培养方法

培养基:MEM＋15% FBS＋1% P/S

生长条件:气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是公司正在在热销的产品：
HCT116/L 人耐奥沙利铂耐药株alpha-熊果苷(标准品)alpha-Arbutin 质量规格：HPLC≥98%,标准品

SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) L-羟基脯氨酸(标准品)L-Hydroxyproline质量规格：HPLC≥98%，标准品

人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0L-羟基脯氨酸L-Hydroxyproline质量规格：>99%,BR

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) L-正亮氨酸L-Norleucine质量规格：>98%,BR

人脐带单核细胞完全培养基 100mLFmoc-D-4-苯丙氨酸Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH质量规格：HPLC>98%
黄牛皮肤细胞;BTA-S2亮抑蛋白酶肽(进口)质量规格：≥95%,进口半硫酸盐Leupeptin

KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制剂质量规格：≥90%,进分Pepstatin A microbial

CM-H052人胎盘绒毛膜细胞完全培养基100mL胆红素质量规格：≥85%,BRBilibubin

IL9R Others Rat 大鼠 IL9R / Ierleukin 9 receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 比伐卢定(TFA)质量规格：度大于98%Bivalirudin TFA

小鼠脉络膜细胞完全培养基 100mL比马素/贝美前列素质量规格：度> 99%Bimatoprost
Promocell C-28051 Monocyte Attachme Medium, 单核细胞附着培养基(即用型) 250ml薄荷醇（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Menthol

人上皮样细胞;BEAS-2B补骨脂定（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Psoralidin

DCBLD2 Others Human 人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 补骨脂二氢黄酮;补骨脂甲素质量规格：HPLC≥98%，标准品Bavachin

CL-0368INS-1(大鼠胰岛细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2补骨脂酚(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Bakuchiol

EL4IL-2细胞，瘤细胞 人急性早幼粒细胞,NB4细胞 人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)D-(-)-奎宁酸（标准品）质量规格：≥98%，标准品D-(?)-Quinic acid
人永生化角质形成细胞培养大鼠肝细胞;BRL 3A托伐普坦 Tolvaptan质量规格：度≥99.0%，BR,可用于细胞培养

GDF15 Others Human 人 GDF-15 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺噻唑Sulfathiazole质量规格：>99%,BR

小鼠胚胎成纤维细胞MEF磺胺噻唑(标准品)Sulfathiazole质量规格：含量测定

MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 环苯扎林盐酸盐Cyclobenzaprine HCl质量规格：>99%,BR

人胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1盐酸美托咪定Medetomidine HCl质量规格：≥99.0%,BR
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
人永生化角质形成细胞培养来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。