小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞 冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞
种属:alpha TC1 clone 6

类型:alpha cells

形态:epithelial

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

安全等级:2

模式菌株:未知

应用领域:The alpha TC1 clone 6 cells are useful for studying many aspects of islet biology, including glucagon biosynthesis and cytokine sensitivity.

培养方法

培养基:90%高糖DMEM+10%FBS

传代方法:Volumes used in this protocol are for 75 cm2 flasks; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes. NOTE: Warm all solutions to 37.0°C prior to use Transfer all medium and floating cells from flask to a 50 mL centrifuge tube. Adherent cells are removed using Cell Dissociation Buffer (an enzyme free buffer; Invitrogen, Catalog No. 13150-016) diluted 1:5 with Hanks' Balanced Salt Solution. Add 5.0 mL of diluted cell dissociation buffer per 75 cm2 flask and gently rock flask to bathe the cells at room temperature for 1 to 2 minutes. Allow the flask to remain at room temperature for 1 to 5 additional minutes until cells have detached from the flask. Firmly tap the flask against palm of hand to dislodge cells. Add 10.0 mL of fresh medium per 75 cm2 flask and triturate up and down directing the stream along the growth surface of the flask to dislodge the cells and break up some of the clumps. Transfer these cells to the centrifuge tube from Step 1. Centrifuge at 125 x g  for 5 to 10 minutes. Remove medium and resuspend pellet in fresh complete medium. Add appropriate aliquots of cell suspension to new culture vessels. Incubate cultures at 37°C. Subcultivation ratio: A subcultivation ratio of 1:3 to 1:4 is recommended. Medium renewal: Every 2 to 3 days.

生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

生长特性:adherent, with loosely attached clusters and some single cells in suspension

存储条件:50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞 的相关热销产品：
人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1双去氧基姜黄素(标准品)Bisdemethoxycurcumin质量规格：HPLC≥98%，标准品

TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人细胞裂解液 (阳性对照) L-山梨糖(标准品)L-(-)-Sorbose质量规格：分析标准品

KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤()糖精钠 水合物(标准品)Saccharin  salt hydrate质量规格：分析标准品

SiHa人子宫颈鳞癌细胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培养基(GIBCO)+10%FBS标准溶液(0.05000mol/L(0.1N))Iodine solution质量规格：0.05000mol/L(0.1N)

SHH Protein Mouse 重组小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 标签)标准溶液(1000μg/ml,溶剂：水)Iodine solution质量规格：1000μg/ml,溶剂：水
家猫皮肤细胞;FCA-S1 胚，HFL-I细胞 IEC-6细胞，大鼠小肠隐窝上皮细胞柠檬酸三丙酯(>97.0%(T))质量规格：>97.0%(T)Tripropyl

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CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200RLa 人细胞裂解液 (阳性对照) D-(+)-樟脑(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)(+)-Camphor

原代成纤维细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml阿卡波糖十三醋酸酯质量规格：美国进口Acarbose Tridecaacetate

CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬苦素，黄柏内酯(橙皮提取) 质量规格：HPLC≥98%,橙皮提取Limonin
TF-1(人血液细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠细胞;BC3H1CHAPSO3-[(3-胆胺基)二甲基基]-2-羟基-1-磺酸内盐25克ACS

人间充质干细胞-*裂解物HMSC-hp L没食子酸一水物 Gallic acid,≥98.0% 99-24-1 25G 通用试剂

AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人细胞裂解液 (阳性对照) 肝速内;肝速;肝鳞脂 Hqpcrin wo7ium sclt;Hqpscl;Lipohqpin;LiquqMin;Lipohqpinqttq;Longhqpcrin;Monopcrin;Pcnhqprin;Pulcrin 9041-8-1

正常小鼠Leydig细胞;TM3选择性巧克力平板1米

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2 III型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL13494-80-9碲块Tellurium
小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞 小鼠皮质神经元MN-c桑皮苷A（标准品）Mulberroside A质量规格：HPLC≥98%，标准品

MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人细胞裂解液 (阳性对照) 桑色素(标准品)Morin质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠*上皮细胞完全培养基 100mL沙苑子苷A（标准品）Complanatoside A质量规格：HPLC≥98%，标准品

BALL-1人B细胞急性细胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(内含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清山栀苷甲酯（标准品）Shanzhiside methylester质量规格：HPLC≥98%，标准品

EGF Protein Canine 重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 标签)商陆皂苷甲(标准品)Esculentoside A质量规格：HPLC≥98%，标准品
收到小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞 处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。