细胞培养过程：

冷冻保存细胞之方法：
人乳腺导管瘤细胞培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人乳腺导管瘤细胞培养
种属:BT-474

形态:上皮样；圆形、成团　

培养方法

培养基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；0.01mg/mlInsulin　

传代方法:1:2~1:3传代；2~3天换液1次。

生长特性:贴壁生长

存储条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人乳腺导管瘤细胞培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人乳腺导管瘤细胞培养的相关热销产品：
人癌细胞;MDA-MB-231头孢克1Cefixime质量规格：>98%,BR

KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人细胞裂解液 (阳性对照) NDSB 256(>NDSB 256质量规格：>98%,BR

MT-4 人急性母细胞细胞NDSB-211NDSB-211质量规格：BR

A-673 人横纹肌瘤细胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS中性红染色液Neutral red solution(1X)质量规格：Ind Grade

TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)镍粉(>99.5%,SP)Nickel powder质量规格：>99.5%,SP
盘羊皮肤细胞;ASHS3 卵巢细胞，Lec1细胞 L7712细胞，615小鼠T细胞性瘤株Fmoc-L-缬氨酸质量规格：>98%,BRFmoc-Val-OH

SV40T转化的人胚肾细胞;293TFmoc-N-三苯甲基-L-天冬酰胺质量规格：>98%,BRFmoc-Asn(Trt)-OH

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) N'-芴甲氧羰基-N-苄氧羰基-L-赖氨酸质量规格：≥98%,BRFmoc-Lys(Z)-OH

CL-03142V6.11(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2E-64d,蛋白酶抑制剂,阿洛司他丁质量规格：>98%,BRE64d,E-64d

HA Others H7N7 甲型 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2’-脱氧胞苷-5‘-1酸二钠盐质量规格：>98%，BRdCMP,2Na
人*腺泡上皮癌;HPAC1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC))质量规格：>88.0%(GC)1-Bromo-4-decylbenzene

IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC))质量规格：>90.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene

人细胞;Hela S3 [HeLaS3]1-溴-4-十二烷基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene

TMED1 Others Human 人 TMED1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-丁基苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)1-Bromo-4-butylbenzene

人肝实质细胞完全培养基 100mL1-硝基芘(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)1-Nitropyrene
人乳腺导管瘤细胞培养小鼠树突状细胞细胞;DCS腺苷-5'-二1酸三锂盐ADP.Li3质量规格：>97%,BR

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人细胞裂解液 (阳性对照) 赤藓醇;赤藓糖醇Erythritol质量规格：>99%,BR

SK-N-BE(2)人神经母细胞瘤细胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS5ˊ-二1酸腺苷钡盐ADP.Ba质量规格：>98%,BR

TG-905细胞，人脑胶质母细胞瘤细胞 荧光假单胞菌 人滋养层绒毛细胞总RNAHVT NA二1酸腺苷单钾盐ADP.K质量规格：>97%,BR

RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2肌苷-5'-二1酸二钠盐IDP.Na2质量规格：>98%,BR