产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CSX3449 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 详见说明书 |
细胞形态 | CM2-1培养液中,悬浮,淋巴母细胞样,圆形 |
是否是肿瘤细胞 | 是 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 悬浮生长 |
物种来源 | 详见说明书 |
包装规格 | 详见说明书 |
纯度 | 详见说明书% |
是否进口 | 是 |
人单核细胞形态来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 类型 | 佛号 |
人单核细胞形态 | 悬浮生长 | CSX3449 |
资源名称 人单核细胞
种属:THP-1
类型:悬浮生长
形态:CM2-1培养液中,悬浮,淋巴母细胞样,圆形
分离基物:该细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性的男孩的外周血中分离建立。
提供形式:复苏形式:15ml离心管1支;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
应用领域:该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白,表达C3R和FcR;可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化;可作为转染宿主。
培养方法
传代方法:将培养好的悬浮细胞轻轻吹打均匀,分配至3~6个新鲜培养液皿中,轻轻摇匀后放入培养箱培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养液,含谷氨酰胺。
生长特性:维持细胞浓度在2~4×105~8×105/ml,勿超过1×106/ml;2~3天换液1次。
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
培养操作步骤:
人单核细胞形态1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是公司正在在热销的产品:
JEG-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 轮环藤宁四乙酸/1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid质量规格:>95%
人成细胞;Saos-2p, p’-DDE(标准品)p, p’-DDE质量规格:分析标准品
PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) p, p’-DDE标准溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution质量规格:100μg/ml,u=3%
CL-0429Romas(人瘤细胞)5×106cells/瓶×2敌草腈(标准品)Dichlobenil质量规格:分析标准品
人绒毛膜内皮细胞 人胚胎皮肤成纤维细胞,CCC-ESF-1细胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母细胞)乙二醇苯(标准品)Ethylene glycol monophenyl ether质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)
人急性母细胞性细胞;MOLT-4布地奈德(标准品)Budesonide质量规格:HPLC>98%,标准品
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 亚叶酸钙Calcium Folinate质量规格:>98%,水合物,BR
CM-H110人皮肤肥大细胞完全培养基100mL亚叶酸钙(标准品)Calcium Folinate质量规格:>98%,含量测定
5-8F, 人高转移细胞系 瘤,EL4IL-2细胞 PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)喜树碱Camptothecin质量规格:> 99%,喜树提取
小鼠浆细胞瘤;MPC-11喜树碱(标准品)Camptothecin质量规格:HPLC≥99%,标准品
CCL18 Protein Human 重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 标签)偏钒酸钠shēng huà shì jì容量:0.25毫升
MCF-7(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-
猫肾细胞;CRFK正shēng huà shì jì容量:100克
人颅骨造骨细胞 (HCO) ( 5×105 )马丁肉汤shēng huà shì jì容量:RT支
CL-0099HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞)5×106cells/瓶×278-79-5, 99%Isoprene
人单核细胞形态HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)质量规格:>90.0%(T)
小鼠子细胞;U14三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)铕(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)eur(III)质量规格:>95.0%(T)
METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
CM-M001小鼠肺微内皮细胞完全培养基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格:>98.0%(T)
Hela, 人细胞系 小鼠成纤维细胞,3T3TK细胞 SPA-A1()4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪(升华提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)质量规格:>96.0%(HPLC)
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线