人子宫内膜腺癌细胞说明书冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人子宫内膜腺癌细胞说明书
种属:HEC-1-A

类型:贴壁生长

形态:CM5-1培养液中，贴壁，上皮样细胞，多角形

分离基物:这株细胞及其亚株HEC-1-B是H.Kuramoto及其同事1968年从一位IA期患者身上分离得到的。

提供形式:复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。

安全等级:1

模式菌株:未知

应用领域:PAF可以诱导其c-fos的表达。

培养方法

培养基:90%McCoy’s 5a+10%FBS

传代方法:将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约2min取出。传代用12mL CM5-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件:37℃，5%CO2，CM5-1培养液。CM5-1培养液：90%Mc Coy’s 5a+10%FBS。Mc Coy’s 5a：Mc Coy’s 5a培养液。

存储条件:冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人子宫内膜腺癌细胞说明书的相关热销产品：
EPOR Others Human 人 EPOR / Erythropoietin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 芴(标准品)Fluorene质量规格：分析标准品,≥99.5%(HPLC)

人二倍体细胞;HELβ-胡萝卜素（标准品）β-Carotene质量规格：HPLC≥90%，标准品

大鼠条纹神经元(RNs)(1×106)胡麻属苷（标准品）Sesamoside质量规格：HPLC≥98%，标准品

CM-H015人成纤维细胞完全培养基100mL葫芦巴碱盐酸盐（标准品）Trigonelline 质量规格：HPLC≥98%，标准品

615小鼠T细胞性瘤株;L7712 小鼠肾实质细胞完全培养基 100mL葫芦素B(标准品)Cucurbitacin B质量规格：HPLC≥95%，标准品
人膀胱平滑肌细胞(HBdSMC)( 5×105 )3-甲氧基地氯雷他定质量规格：美国进口3-Methoxy Desloratadine

CL-0163MSTO-211H(人细胞)5×106cells/瓶×2异地氯雷他定质量规格：美国进口Iso Desloratadine

人细胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘细胞完全培养基 100mLN-甲基地氯雷他定质量规格：美国进口N-Methyl Desloratadine

raw264.7 小鼠单核巨噬细胞细胞5-羟基地氯雷他定质量规格：美国进口5-Hydroxy Desloratadine

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 丹酚酸B（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Salvianolic acid B
小鼠成纤维细胞;φ2 小鼠气管上皮细胞完全培养基 100mLN-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺100克

HCT116/L 人耐奥沙利铂耐药株减性蓝6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8

SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8

人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0氢氧化铝1克

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) (IV型胶原酶)
人子宫内膜腺癌细胞说明书ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解液 (阳性对照) 岩白菜素(标准品)Bergenin质量规格：HPLC≥98%，标准品

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21岩白菜素Bergenin质量规格：>97%,BR

TLR2 Others Human 人 TLR2 / CD282 (aa 1-587) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸巴马汀,盐酸掌叶防己碱(标准品)Palmatine 质量规格：HPLC≥98%，标准品

CL-0025AR42J(大鼠*外分泌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸巴马汀,盐酸掌叶防己碱Palmatine 质量规格：HPLC≥97%,BR

Hepa 1-6, 小鼠细胞 细胞,RCC-krause细胞 SK-HEP-1(细胞)盐酸黄柏碱(标准品)Phellodendrine chloride质量规格：HPLC≥98%，标准品
收到人子宫内膜腺癌细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。