人细胞形态冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人细胞形态
种属:COLO 205

类型:结直肠腺癌，腹水转移。

形态:上皮样

培养方法

培养基:RPMI-1640(GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。

生长特性:贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人细胞形态的相关热销产品：
SK-N-SH细胞，人神经上皮瘤细胞 环状芽孢杆菌 人上皮细胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氢氧化钙(>95%,BR)Calcium hydroxide质量规格：>95%,BR

SF767(人细胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐伦克林N-Formyl Varenicline质量规格：美国进口

HCT-15(人细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐伦克林Varenicline N-Glucoside质量规格：美国进口

人细胞;CNE-2Z伐伦克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) 去乙酰基长春瑞滨Deacetyl Vinorelbine质量规格：美国进口
人表皮角质细胞-cDNAHEK-acDNA6-硫鸟嘌呤(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品6-TG/Thioguanine

MCF/Adr细胞，人癌阿霉素耐药细胞株 团头鲂尾鳍细胞,WCF细胞 骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)维A酸;全反式维A酸;维生素A酸;视黄酸质量规格：>98%%,USP,BRAll-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin

2V6.11(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2维A酸;(标准品)质量规格：>98%,标准品All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin

HCF Pellet 人类*成纤维细胞团块 > 1 mio.cells 人海马趾星形胶质细胞裂解物HA-h L比卡鲁胺质量规格：>99%,BRBicalutamide

CL-0210SiHa(人子宫颈鳞癌细胞)5×106cells/瓶×26-苄氨基嘌呤质量规格：>99%6-Benzylamino purine
L-6TG细胞，肌母细胞 人细胞,JCA-1细胞 人胚;MRC-5间硝基本胺100u

猕猴皮肤细胞;MMS4啊利新蓝8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人细胞裂解液 (阳性对照) γ-环糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3

人肾上皮细胞总RNAHREpiC NA，英文名或英文缩写：potewwium xy7noxide，级别：CP，98%，规格：100克

小鼠少突胶质前体细胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原装 INALCO1758-0100
人细胞形态LLC-MK2细胞，恒河猴肾细胞 人转基因细胞,RKO-E6细胞 CM-H117人脑内皮细胞完全培养基100mL山梨酸钾（标准品）Potassium Sorbate质量规格：含量测定

正常大鼠肾细胞;NRK甲磺酸倍他司汀（标准品）Betahistine mesylate质量规格：含量测定

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡醛内酯（标准品）Glucurolactone质量规格：检查

小鼠小胶质细胞MM反铂transplatin 质量规格：>95%

FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 草酸（标准品）Oxalic acid质量规格：含量测定
收到人细胞形态处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。