细胞培养过程：

冷冻保存细胞之方法：
细胞株培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　细胞株培养
种属:HepG2/TC155

形态:上皮样

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到细胞株培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是细胞株培养的相关热销产品：
16HBE 人上皮细胞普罗胺（标准品）Iopromide质量规格：检查用

CL-0263BGC-803(人细胞)5×106cells/瓶×2奥美拉唑钠一水合物（标准品）Omeprazole  Monohydrate质量规格：含量测定

RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞盐酸地匹福林（标准品）Dipivefrin 质量规格：含量测定

Asp2人胚胎肾细胞转化细胞;FC33 人肾小球内皮细胞完全培养基 100mL甲基麦冬黄酮A（标准品）Methylophiopogonone A质量规格：HPLC≥98%,标准品

人肝窦内皮细胞RNAHHSEC miRNA5 μg喷昔洛韦（标准品）Penciclovir质量规格：含量测定
人雪旺细胞 ( HSC) ( 5×105 )瑞氏色素shēng huà shì jì容量：100克

MDA-MB-231, 人癌细胞3-[N，N-双(2-羟乙... 3-[bis(2-hydroxyethyl)amino]-2-hydroxy... 68399-80-4 10G 通用试剂

人非小细胞;NCI-H157 大鼠子宫成纤维细胞完全培养基 100mL4-派啶加醋 Isonipqcotic ccid 498-94-

H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤细胞化铜shēng huà shì jì容量：RT100克

CD28 Others Human 人 CD28 人细胞裂解液 (阳性对照) 57-58-1四化铵;化四甲基铵TetrametxylaMMoniuM iodide
人低分化;GLC-82 [GLC82] 大鼠食管上皮细胞完全培养基 100mLCHLORIDE,ANxy7noUS录化,无水*100G7786-30-3RT

破骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)高录醋铵(*)(易制暴) cMMONIUM PqRCHLORcTq DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人细胞裂解液 (阳性对照) LaminarinfromLaminariadigitata海带多糖100U高，98%

小鼠胚胎成纤维细胞;PA317牛血清白蛋白(第五组份)25克RT

LTEP-P细胞，人小细胞细胞 小鼠前成骨细胞,MC-3T3细胞 CL-0130K-562(人细胞)5×106cells/瓶×2BetaineHCl 100g/250g/1kg原装 Amresco K186
细胞株培养EB病毒转化的人B细胞;KM9401盐酸莫西沙星Moxifloxacin 质量规格：>99%,BR

PANC-1细胞，*癌细胞 人细胞系,SUNE-1亚株6-10B细胞 CL-0339G-401(人Wilms细胞)5×106cells/瓶×2盐酸莫西沙星（标准品）Moxifloxacin 质量规格：HPLC>98%,标准品

中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr昔美酸沙美特罗Salmeterol xinafoate质量规格：>98%,BR

LEFTY2 Others Human 人 Lefty A 人细胞裂解液 (阳性对照) 萘普生Naproxen质量规格：>99%以上，S-构型无结晶水

原代软骨细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml萘普生（标准品）Naproxen质量规格：HPLC>98%,标准品