产地 | 进口、国产 |
保存条件 | ②冻存:用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞混匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CSX3267 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 详见说明书 |
细胞形态 | 悬浮:圆形,抱团生长,贴壁:梭形,两端是细长的触角 |
是否是肿瘤细胞 | 是 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 半悬浮生长,大部分是悬浮生长 |
物种来源 | 详见说明书 |
包装规格 | 详见说明书 |
纯度 | 详见说明书% |
是否进口 | 是 |
人皮肤细胞说明书来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 类型 | 佛号 |
人皮肤细胞说明书 | 半悬浮生长,大部分是悬浮生长 | CSX3267 |
资源名称 人皮肤细胞
种属:SK-MEL-1
类型:半悬浮生长,大部分是悬浮生长
形态:悬浮:圆形,抱团生长,贴壁:梭形,两端是细长的触角
分离基物:该细胞由OettgenF及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性的白人男性患者的胸导管中分离建立的。
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
应用领域:该细胞可产生黑色素,电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性患者和10%其他疾者体内发现了针对该细胞系的抗体。
培养方法
传代方法:将培养液(含悬浮细胞)吸至离心管中,(110g,3min)离心,收集细胞;皿中细胞用PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。①传代:将以上皿细胞用10mL CM2-1培养液终止消化,离心管细胞用2mLCM2-1培养液重悬,共计12mL培养液一并吸至皿里混匀,分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养基,含谷氨酰胺。
存储条件:②冻存:用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞混匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
培养操作步骤:
人皮肤细胞说明书1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是公司正在在热销的产品:
AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate质量规格:BR,>98%
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖无水D-(+)-Trehalose Anhydrous质量规格:≥99%,BR
tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-1F3 弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate质量规格:>98%,二醋酸盐
A549, 人细胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate质量规格:BR,>98%
NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate质量规格:BR,>98%
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-215- 羧基荧光素二乙酸酯;5-CFDA质量规格:0.955-Carboxyfluorescein diacetate
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5(6)-羧基荧光素二乙酸酯质量规格:0.95(6)-Carboxyfluorescein diacetate
骨骼肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)5-氨基荧光素质量规格:>95%5-Aminofluorescein
人间充质干细胞-肝 人肌肉成纤维细胞瘤,C2C12细胞 B16(色素瘤细胞)6-氨基荧光素质量规格:0.956-Aminofluorescein
人小细胞细胞;NCI-H446氯羟喹(标准品)质量规格:HPLC含量测定Clioquinol
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-DL-2-(2-Chloropxenyl)glycineDL-2-录本甘酸100克BR,98%
NCI-H1650细胞,人细胞 小鼠细胞,RM-1细胞 CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基100mL2′-脱氧肌苷 2′-Deoxyinosine,≥98% 890-38-0 100MG 通用试剂
Raji(人Butt's瘤细胞) 5×106cells/瓶×2六亚基亚安98%(剧读) Hqxcmqthylqnqiminq
Promocell C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞生成培养基(即用型) 250ml1,4-pxenylenediaminedixy7nochloride盐酸对本500克超,99%
人骨髓间充质干细胞(hMSCs)Abscisicacid 25mg/50mg/250mg原装 Aldrich 862169
人皮肤细胞说明书ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲哚布芬(标准品)Indobufen质量规格:含量测定
人内皮细胞完全培养基 100mL盐酸曲普利啶(标准品)Triprolidine 质量规格:含量测定
HS-1细胞,人细胞系 滑念珠菌 小鼠*癌细胞(B类);Pan02米力农(标准品)Milrinone质量规格:>98%,标准品
CCL20 Protein Human 重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)壬二酸(标准品)Azelaic acid质量规格:检查
MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利杂质S9780(培哚普利拉)(标准品)Perindoprilat质量规格:供HPLC法系统适用性试验用
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线