小鼠海马神经元细胞系培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　小鼠海马神经元细胞系培养
种属:HT22

类型:贴壁生长

形态:神经元细胞样

分离基物:小鼠，海马

安全等级:1

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90%DMEM+ 10%FBS

传代方法:传代比例建议1:2-1:6.

生长条件:37摄氏度，5%二氧化碳，95%空气

存储条件:90%FBS+10%DMSO
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是小鼠海马神经元细胞系培养的相关热销产品：
人小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL达托霉素Daptomycin质量规格：≥930μg/mg,BR,可用于细胞培养

P388细胞，小鼠细胞 空肠弯曲杆菌 大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-1达托霉素(标准品)Daptomycin质量规格：效价测定

CCL20 Protein Mouse 重组小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)盐酸柔红霉素Daunorubicin HCl质量规格：度大于97%含量84.0-102%,USP30

P815(小鼠肥大细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸柔红霉素(标准品)Daunorubicin HCl质量规格：HPLC≥98%,标准品

人结直肠腺癌细胞;HCT 116 [HCT116]盐酸柔红霉素(进口)Daunorubicin HCl质量规格：USP,进分sigmaD8809
原代软骨细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1mlN-去羟乙基达沙替尼-d8质量规格：美国进口N-Deshydroxyethyl Dasatinib

FCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-羟基达沙替尼质量规格：美国进口4'-Hydroxy Dasatinib

中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-2414-氯柔红霉素质量规格：美国进口14-Chloro Daunorubicin

HLF-02细胞，人胚肺二倍体细胞 大鼠肝星形细胞,CFSC-3H & 5H细胞 CM-M120小鼠角膜上皮细胞完全培养基100mL多1紫杉醇代谢物M4质量规格：美国进口Docetaxel Metabolite M4

SK-Hep-1(人细胞) 5×106cells/瓶×2羟基脱氢硝苯地平羧酸盐质量规格：美国进口Hydroxydehydro Nifedipine Carboxylate
KMB 人胚肺成纤维样细胞1,1-环丁基二酸，英文名或英文缩写：1,1-Cyclobutanedicarboxylic acid，级别：AR，99%，规格：5克

CM-H091人大隐内皮细胞完全培养基100mL磺醋铵 cmmonium sulfcmctq 7773-06-0

GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤D-天门冬酸，英文名或英文缩写：D-Aspartic acid dimetxyl ester xy7nochloride，级别：BR，98%，规格：10克

人癌细胞;MDA-MB-435S 人视网膜微内皮细胞完全培养基 100mL双岐杆菌BS培养基shēng huà shì jì容量：100毫升

人平滑肌细胞总RNAHCSMC NA(2-(环已胺)-1-乙磺酸)
小鼠海马神经元细胞系培养角膜内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)优级真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil质量规格：Viscosity Grade 100

小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) 人，SW 1271[SW-1271;SW1271]细胞 LLC Lewis(细胞)优级真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil质量规格：Viscosity Grade 150

人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17紫尿酸 一水合物(97%)Violuric acid monohydrate质量规格：0.97

TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人细胞裂解液 (阳性对照) 生育酚乙酸酯(标准品)Vitamin E acetate质量规格：分析标准品

中国仓鼠卵巢细胞;TPO-CHO-I1效唑(分析标准品97.5%)Uniconazole质量规格：分析标准品97.5%
收到小鼠海马神经元细胞系培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。