人神经上皮瘤细胞说明书冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：
图
资源名称　人神经上皮瘤细胞说明书
种属:SK-N-MC

类型:贴壁生长

形态:上皮细胞样

分离基物:脑； 眼眶上区神经皮瘤转移灶

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

安全等级:2

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸钠）+10%FBS

生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

存储条件:90%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人神经上皮瘤细胞说明书的相关热销产品：
小鼠T细胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL大内皮素-1（1-38），人Big Endothelin-1 (1-38), human质量规格：>95%,BR

MLF, 小鼠成纤维细胞 Mouse大内皮素-1 （1-39），猪Big Endothelin -1 (1-39),porcine质量规格：>95%,BR

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人细胞裂解液 (阳性对照) 脑钠素-32，大鼠BNP-32, rat质量规格：>95%,BR

人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]铃蟾肽Bombesin质量规格：>95%,BR

TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 缓激肽Bradykinin质量规格：>95%,BR
杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 小鼠脉络膜细胞完全培养基 100mL苄氟噻嗪BendrofluMethiazide质量规格：分析标准品，用于含量测定

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 Human兰雪醌,白花丹醌,白花丹素(标准品)Plumbagin质量规格：HPLC≥98%,进口标准品

EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 黄钟花醌;拉帕醇 (标准品)Lapachol 质量规格：>98%,进口标准品

人红系细胞;TF-1亮菌甲素Armillarisin A质量规格：TLC鉴别

人脂肪间充质干细胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)17α-羟基1醇酮17α-Hydroxypregnenolone质量规格：>96%,美国进口
UBA1 Others Human 人 UBE1 / UBA1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 肌酸激酶测试盒shēng huà shì jì容量：RT100支/包

CL-0177OS-RC-2(人细胞)5×106cells/瓶×22,3-二羌基本全 2,3-Dixy7noxybqnzcldqhydq 4677-78-9

Saos-2，人成细胞 高分化细胞，CNE-1细胞 RBL-2H3(细胞)shēng huà shì jì容量：1公斤

人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]shēng huà shì jì容量：25克

FOLR2 Others Human 人 FOLR2 / FBP 人细胞裂解液 (阳性对照) 55289-35-52-溴-6-硝基2-Bromo-6-nitnotolue
人神经上皮瘤细胞说明书MDA-MB-436人腺癌细胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培养基+10%FBS右美沙芬-d3Dextromethorphan-d3质量规格：美国进口

FAM3C Protein Human 重组人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 标签)贝沙罗汀-d4Bexarotene d4质量规格：美国进口

小鼠雪旺细胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌细胞 Human二氢酮洛芬(非对映)Dihydro Ketoprofen (Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系*);CHO-K1二氢酮洛芬β-D-葡萄糖苷酸,非对映Dihydro Ketoprofen β-D-Glucuronide, Mixture of Diastereomers质量规格：美国进口

PNLIPRP1 Others Human 人 PNLIPRP1 / PLRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 来氟米特3-异构体Leflunomide 3-Isomer质量规格：美国进口
收到人神经上皮瘤细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。