产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CSX3214 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 详见说明书 |
细胞形态 | 形态:CM2-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,多角形,紧密排列 |
是否是肿瘤细胞 | 是 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 贴壁生长 |
物种来源 | 详见说明书 |
包装规格 | 详见说明书 |
纯度 | 详见说明书% |
是否进口 | 是 |
培养操作步骤 :
人细胞培养1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品名称 | 类型 | 佛号 |
人细胞培养 | 贴壁生长 | CSX3214 |
资源名称 人细胞
种属:HeLa
类型:贴壁生长
形态:CM2-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,多角形,紧密排列
分离基物:宫颈腺癌,女性
提供形式:复苏形式:T25细胞培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
应用领域:角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 有报告称MS751细胞含有人乳头状瘤病毒18 (HPV-18)序列。 据报道,p53表达水平低,pRB(成视网膜细胞瘤抑制因子)表达水平正常。
培养方法
传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约4min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养液,含谷氨酰胺。
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是公司正在在热销的产品:
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3地西他滨/ 5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷Decitabine质量规格:>99.5%,BR,可用于细胞培养
APCS Others Human 人 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 地西他滨/ 5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷(标准品)Decitabine质量规格:HPLC>98%,标准品
兔脂肪间质干细胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷5-Aza-2′-deoxycytidine质量规格:>97%,进分sigma货号A3656
BE(2)-M17细胞,人神经母细胞瘤细胞 寄生曲霉 293来源病毒包装细胞;ΦA醋酸德舍瑞林Deslorelin Acetate质量规格:>99%,BR
SUP-B15(人Ph+急淋细胞系) 5×106cells/瓶×2去氨加压素;去氨压素Desmopressin Acetate质量规格:>98%,BR,醋酸盐形式
猪肾传代细胞;IBRS-2硫酸羟氯喹(标准品)质量规格:UV法溶出度检查Hydroxychloroquine sulfate
GBP1 Others Human 人 GBP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 车叶草苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Asperuloside
木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mLGaleterone (TOK001)质量规格:>98%,CYP17抑制剂TOK-001
PC9-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 PC9-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷质量规格:HPLC≥85%,标准品Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside
IL32 Protein Human 重组人 Ierleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 标签)物质P(1-9)质量规格:>95%,BRSubstance P (1-9)
人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL丁香油shēng huà shì jì容量:RT5盒
Hepa 1-6细胞,小鼠细胞 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞) EB病毒转化的人B细胞;KMY09232,2’-联 2,2'-Biinoneolinq 119-91-2
CCL8 Protein Human 重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签)葡聚糖T6shēng huà shì jì容量:20毫克
SK-Hep-1(人细胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL17RD 人细胞裂解液 (阳性对照) D-亮酸盐酸盐5克RT
人胚;MRC-57512-17-6N-乙酰-D-葡萄糖胺;N-乙酰-D-基葡萄糖;2-乙酰基-2-脱氧-D-葡萄糖N-Acetyl-D-glucosaMine;D-GlcNAc
人细胞培养滋养层细胞生长添加物TGS紫脲酸铵(ACS)Murexide质量规格:ACS
VSIG2 Others Human 人 VSIG2 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基紫,龙胆紫methyl violet质量规格:BS
COS-7 非洲绿猴SV40 转化的肾细胞硝氮黄Nitrazine yellow质量规格:IND
CL-0014A-375(人恶性色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2中性红Neutral red质量规格:BS
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞橙黄ⅣOrange Ⅳ质量规格:IND
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人细胞培养来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。