冷冻保存细胞之方法：
人卵巢颗粒细胞说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人卵巢颗粒细胞说明书
种属:COV434

类型:贴壁生长

形态:CM2-1培养液中，贴壁，上皮细胞样， 多数细长型，少部分多角形，排列紧密

分离基物:人，卵巢颗粒细胞癌；女性

提供形式:冻存管/T25培养瓶

安全等级:1

模式菌株:未知

培养方法

传代方法:将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约3min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件:37℃，5%CO2，CM2-1培养液。CM2-1培养液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培养基，含谷氨酰胺。

存储条件:冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜移至液氮中保存。
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人卵巢颗粒细胞说明书的相关热销产品：
人前脂肪细胞完全培养基 100mL海醇Iohexol质量规格：>98%,BR

MC细胞，大鼠巨噬细胞 THP-1(人单核细胞) 中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO-HCV-NS4A麦芽1酸化酶, 硫酸铵悬浮液Maltose Phosphorylase 5U/mg质量规格：BC Grade

EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)嗪草酮(>95%,植物激素级)Metribuzin质量规格：>95%,植物激素级

BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)4-甲基伞形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷MU-alpha-GAL质量规格：分子生物学级

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3粘酸(>98%，BC)Mucic acid质量规格：>98%，BC
猪肾细胞;PK(15)5-TAMRA；5-羧基四甲基罗丹明琥珀脂质量规格：>90%5-TAMRA, SE

PIGR Others Human 人 PIGR 人细胞裂解液 (阳性对照) 吉拉尔特试剂T质量规格：0.98Girard’s reagent T

CM-M047小鼠肠微细胞完全培养基100mL硫酸长春新碱/硫酸醛基长春碱(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Vincristine Sulfate

TACSTD2 Others Mouse 小鼠 OP2 / TACSTD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 帕唑帕尼质量规格：>99%,BRPazopanib

小鼠肾小管上皮细胞完全培养基 100mL非洛地平/非氯地平质量规格：>98%,USP30,BRFelodipine
ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿托伐他汀甲酯质量规格：美国进口Atorvastatin Methyl Ester

肾小管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)氮卓斯汀-13C,d3质量规格：美国进口Azelastine-13C,d3

IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-去甲氮卓斯汀质量规格：美国进口N-Desmethyl Azelastine

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4(S)-盐酸氮卓斯汀质量规格：美国进口(S)-Azelastine

中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 细胞，C127细胞 J774A.1细胞，鼠腹水单核细胞瘤阿替洛尔-d7质量规格：美国进口Atenolol-d7
人卵巢颗粒细胞说明书豚鼠胚胎细胞;104C1紫檀芪（标准品）Pterostilbene质量规格：HPLC≥98%，标准品

LTEP-a-2细胞，人 猴肾细胞系,VERO E6细胞 CM-M050小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基100mL紫檀芪,紫檀Pterostilbene质量规格：>99%,BR

SHG-44 (人细胞) 5×106cells/瓶×2鱼藤酮Rotenone质量规格：>90%,BR

NHEK.f-c pooled 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)少年，混合 500,000cells 原代上皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml7-表紫杉醇（标准品）7-Epitaxol质量规格：HPLC≥98%，标准品

子宫成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)澳洲茄胺;澳州茄胺（标准品）Solasodine质量规格：HPLC≥98%，标准品
收到人卵巢颗粒细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。