产地 | 进口、国产 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CP934896 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | 详见说明书% |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
乳酸杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒 | CP934896 |
产品及特点:
本试剂盒可用于检测食品或其他材料中是否有的成分。现代食品加工工艺极大改变了食材原有的味道、气味、色泽、纹理和质地等特性,因此传统的感官鉴别技术已经无法对食材的真伪进行准确的鉴定。同时部分食材还有致敏性,因此基于基因检测的快速灵敏的食材来源检测技术将对食品监管和安全提供重要的保障。本产品就是为满足这一需求根据 PCR 原理开发的产品,它具有下列特点:
1. 一管式操作,用户只需要提供样品即可。
2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物,能专一性检测出样品中的大豆成分,但不能检测其他非大豆成分。
3. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪,无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%,对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研,足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
PCR反应五要素:
产品仅供科研使用参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子*很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
产品特征:
乳酸杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。
特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增 。
重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。产品仅供科研使用
猪内源性逆转录病毒前病毒(PERV-pre)核酸检测试剂盒 48T Stanolone 521-18-6 中文名:雄诺龙 分子式:C19H30O2 度:98.0% 关键词:
猪内源性逆转录病毒(PERV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T Stanolone 中文名:雄诺龙 分子式:C19H30O2 度:98.0%
猪内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 Stanozolol 中文名:康力龙 分子式:C21H32N2O 度:98.0%
猪内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit Testosterone decanoate 5721-91-5 中文名:癸酸睾酮 分子式:C29H46O3
猪内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Stanozolol 中文名:康力龙 分子式:C21H32N2O
Prasugrel 150322-43-3 中文名:普拉格雷 分子式:C20H20FNO3S 豚鼠白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
Fexofenadine hydrochloride 153439-40-8 中文名:盐酸非索非那定 分子式:C32H40ClNO4 Human hepatocellular carcinoma aigen (PHC) ELISA Kit 人抗原(PHC)ELISA试剂盒
Adefovir 106941-25-7 中文名:阿德福韦 分子式:C8H12N5O4P rabbitiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
trans-4-Aminocyclohexanol 27489-62-9 中文名: 分子式:C6H13NO CLIAKitforATG(Humanai-thymocyteglobulin)ELISAKit人抗胸腺细胞球蛋白规格:48T/96T
Cyproheptadine hydrochloride 969-33-5 中文名:盐酸赛庚啶 分子式:C21H22ClN 线粒体复合物I蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次
Senkyunolide C 91652-78-7 中文名:洋川芎内酯C 分子式:C12H12O3 Humanplacealprotein,PPELISAKit人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Pilosol A 501086-15-3 中文名: 分子式:C13H12O Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒
Glycerol 56-81-5 中文名:甘油 分子式:C3H8O3 HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Riligustilide 89354-45-0 中文名: 分子式:C24H28O4 Humandeoxypyridinoline,DPDELISA试剂盒人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
乳酸杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒Paris Saponin VII 68124-04-9 中文名:重楼皂苷VII 分子式:C51H82O21 Mouseai-thyroid-globulinaibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Polyphyllin D 50773-41-6 中文名:重楼皂苷D 分子式:C44H70O16 HumanEotaxin1ELISA试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Sitostenone 1058-61-3 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 组织PKG-I激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 36450-02-9 中文名:6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人胰激肽原酶(PK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
22-Dehydroclerosteryl acetate 28594-00-5 中文名: 分子式:C31H48O2 兔子高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
使用方法:
一、乳酸杆菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL超纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。