产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CS-E10847 |
用途 | 仅用于科研 |
检测方法 | 详见说明书 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
适应物种 | 详见说明书 |
检测限 | 5pg/mL~160pg/mL |
数量 | 44 |
包装规格 | 详见说明书 |
标记物 | 详见说明书 |
纯度 | 98% |
样本 | mitogen activited protein kinase 3 |
应用 | 详见说明书 |
是否进口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa试剂盒。
产品名称 | 英文名称 | 检测范围 |
人丝裂原活化蛋白激酶3ELISA试剂盒 | mitogen activited protein kinase 3 | 5pg/mL~160pg/mL |
自备物品:
酶标仪(450nm)
高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒温箱
自备的设备及试剂:
1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的EP管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
试剂盒性能:
人丝裂原活化蛋白激酶3ELISA试剂盒 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
灵敏度:*检测浓度小于0.1 pg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月
双抗体夹心法(检测未知抗原) | 间接法(检测未知抗体) |
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 | 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标*抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
SW579(人甲状腺鳞癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2辛弗林Synephrine质量规格:>98%,BR
HSaVEC-c 人隐内皮细胞(HSaVEC) 500,000cells 成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)辛弗林盐酸盐Synephrine HCl质量规格:HPLC≥98%,标准品
肾小管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)三尖杉宁碱(标准品)Cephalomannine质量规格:HPLC≥98%,标准品
GHR Others Rat 大鼠 GHR / Growth Hormone Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 吉莫斯特;吉美嘧啶(标准品)Gimeracil质量规格:>99%,标准品
NRL1 化大家鼠肺成纤维样细胞吉莫斯特;吉美嘧啶Gimeracil质量规格:>98%,二氢嘧啶脱氢酶(DPD)抑制剂
CXCL16 Protein Canine 重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 标签)2,7-二溴-9,9-二己基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene质量规格:>98.0%(HPLC)
MGC80-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,7-二溴-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene质量规格:>98.0%(HPLC)
黄牛皮肤细胞;BTA-S24,5-亚乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC))4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione质量规格:>98.0%(GC)
IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-乙撑二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one质量规格:>98.0%(GC)
肾小球内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one质量规格:>95.0%(HPLC)
PANC-1人细胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS汉黄芩素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Wogonin
坏死因子蒿本内酯(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Ligustilide
人主动脉内皮细胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus和厚朴酚(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Honokiol
小鼠瘤细胞;EL4和厚朴酚(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Honokiol
TFRC Others Mouse 小鼠 TFRC / CD71 / ansferrin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 癸氟奋乃静(标准品)质量规格:含量测定Fluphenazine Decanoate
人丝裂原活化蛋白激酶3ELISA试剂盒HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;MMK3录化1公斤
人导管瘤细胞;BT-474姆沙伯W/AW-DMCS CHROMOSORB W/cW-DMCS
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 邻苯 o-Phenylenediamine (≥98%, OPD) 10G 通用试剂
CM-R022大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mL录化三本四氮唑沙保罗培养基25毫升2~8℃
Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞细胞 牛肾细胞,MDBK细胞 Hs 578Bst(人成纤维细胞)(D-基半乳糖)
操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。