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公司实验室

察氏培养基
(Czapek-DoxAgar)

用途：

察氏培养基用于培养能以硝酸盐作为*氮源的真菌和细菌，及青霉和曲霉等霉菌的分离培养和形态鉴别。

原理：

硝酸钠提供氮源;磷酸氢二钾是缓冲剂;硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁提供必须的离子;蔗糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。

察氏培养基配方(每升)：

硝酸钠3g

磷酸氢二钾1g

硫酸镁0.5g

氯化钾0.5g

硫酸亚铁0.01g

蔗糖30g

琼脂15g

最终pH 7.3±0.2

使用方法：

1、称取察氏培养基50g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，待冷至55—60℃倾注灭菌平板;或将培养基溶解分装三角瓶或试管，灭菌后倒平板或制成斜面。

2、将纯培养物点植于平板上。方法是将平板倒转，向上接种一点或三点，每菌接种两个平板，倒置于25—28℃温箱中培养。当刚长出小菌落时，取出一个平皿，以无菌操作，用小刀将菌落连同培养基切下1cm×2cm的小块，置菌落一侧，继续培养，于5—14d进行观察。

3、斜面观察：将霉菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或点种(链刀菌或其他菌)于斜面，培养5—14d，观察菌落形态，同时还可以将菌种管置显微镜下用低倍镜直接观察孢子的形态和排列。

察氏培养基按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
人结直肠腺癌细胞;HCT-8 [HRT-18]三乙酰基-β-环糊精(>97.0%(HPLC))Triacetyl-β-cyclodextrin质量规格：>97.0%(HPLC)

FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人细胞裂解液 (阳性对照) 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))10,12-Heptacosadiynoic Acid质量规格：>98.0%(GC)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A52,4-十七二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heptadecadiynoic Acid质量规格：>95.0%(T)

BAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heneicosadiynoic Acid质量规格：>95.0%(T)

人*上皮细胞完全培养基 100mL10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))10,12-Heptadecadiynoic Acid质量规格：>97.0%(T)
小鼠前低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFPN-十八烷酰-D-鞘氨醇N-Stearoyl-D-Sphingosine质量规格：

ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照) N-去异丁基-N-丙基利福布汀N-Desisobutyl-N-propyl Rifabutin质量规格：

人表皮色素细胞-中色素裂解物HELM-m L25-去乙酰基利福喷汀25-Desacetyl Rifapentin质量规格：

CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人细胞裂解液 (阳性对照) 利鲁唑-13C,15N2Riluzole-13C,15N2质量规格：

人脑成纤维细胞完全培养基 100mLN-羟基利鲁唑N-Hydroxy Riluzole质量规格：
人非色素睫状上皮细胞 (HNPCEpiC)( 5×105 )吡拉西坦（标准品）质量规格：含量测定Piracetam

CM-M019小鼠腮腺细胞完全培养基100mL夫拉扎勃（标准品）质量规格：UV法含量测定Furazabol

小鼠细胞;EL4 小鼠*上皮细胞完全培养基 100mL乙水杨胺（标准品）质量规格：含量测定2-Ethoxybenzamide

小鼠神经干细胞(EGFP标记) Mouse枸橼酸（标准品）质量规格：含量测定Citric acid monohydrate

ACRV1 Others Human 人 SP-10 / ACRV1 人细胞裂解液 (阳性对照) 神经肽Y（2-36），人，大鼠质量规格：>95%,BRNeuropeptide Y (2-36) (human,rat) 
察氏培养基培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。