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公司实验室

改良卵磷脂肉汤
(ModifiedLetheenBroth)

用途：

改良卵磷脂肉汤用于化妆品微生物检测中样品稀释和增菌。(FDABAMChapter23，ISO21149：2006，ISO22718：2006，ISO22717：2006，ISO18416：2007)。

原理：

蛋白胨、胰蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可维持均衡的渗透压;卵磷脂，偏重亚硫酸钠和吐温80能中和防腐剂，并能起到在乳浊液中分散物质的功能。

配方(每升)：

蛋白胨20g

胰蛋白胨5g

牛肉膏粉5g

酵母膏粉2g

氯化钠5g

卵磷脂0.7g

吐温805g

偏重亚硫酸钠 0.1g

最终pH7.2±0.2

使用方法：

1、称取改良卵磷脂肉汤42.8g，加入蒸馏水或去离子水1000mL，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管，121℃高压灭菌15min。

2、液体样品：将1ml样品稀释至9ml/管MLB肉汤中;

固体，粉末和膏状和油状产品：称取1克样品至20×150mm含有1ml无菌吐温80的螺口试管，混合均匀后加8ml MLB肉汤。

3、置32.5±2.5℃培养20h或厌氧条件下32.5±2.5℃培养2～3天。

4、观察结果。

改良卵磷脂肉汤图片按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
AAV-293细胞，人人胚肾细胞 大鼠心肌细胞,H9c2(2-1)细胞 CL-0332Dami(人巨核细胞细胞)5×106cells/瓶×2盐酸卡替洛尔（标准品）2(1H)-QUINOLINONE质量规格：鉴别

BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2二甲磺酸阿米三嗪（标准品）Almitrine Bismesylate质量规格：含量测定

HMEpC-c 人类上皮细胞(HMEpC) 500,000cells 人神经细胞HN萝巴新（标准品）Raubasine质量规格：含量测定

原代肝实质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml卡莫氟(标准品)Carmofur质量规格：供HPLC法含量测定用

CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼可占替诺（烟酸占替诺）标准品Xanthinol nicotinate质量规格：供HPLC法含量测定用
LS180细胞，人腺癌细胞 人眼脉络色素瘤细胞,MuM-2B细胞 人脑星形胶质母细胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]阿普斯特;CC10004Apremilast;CC-10004质量规格：>98%,PDE4和TNF-α抑制剂

HGC-27(人细胞) 5×106cells/瓶×2氨丁三醇（标准品）TRISTEARIN质量规格：鉴别

CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸替扎尼定（标准品）Tizanidine hydrochloride质量规格：HPLC法含量测定

人肺微内皮细胞HPMECTubastatin A HCLTubastatin A Hydrochloride质量规格：>98%,HDAC6抑制剂

CASK Others Human 人 CASK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸莫索尼定（标准品）Moxonidine hydrochloride质量规格：含量测定
人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL醋酸Hydrocortisone Acetate质量规格：>98.5%,BR

SAC-II B2细胞，小鼠腹水瘤细胞 BRL 3A(大鼠肝细胞) 人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1醋酸（标准品）Hydrocortisone Acetate质量规格：HPLC>98%,标准品

CCL11 Protein Human 重组人 CCL11 蛋白 (His 标签)盐酸伊达比星IdarubicinHCl质量规格：含量960~1030μg/mg,USP30

RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸伊马替尼Imatinib Mesylate质量规格：>99.0%,BR,可用于细胞培养

人结膜细胞裂解物HConFL甲磺酸伊马替尼（标准品）Imatinib Mesylate质量规格：HPLC>98%,标准品 
改良卵磷脂肉汤图片培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。