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公司实验室

碱性琼脂
(AlkalineAgar)

用途：

碱性琼脂用于霍乱弧菌及其它弧菌的培养。

原理：

蛋白胨、牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;较高的pH有利于，有利于霍乱弧菌的生长。

碱性琼脂配方(每升)：

蛋白胨20g

牛肉膏粉5g

氯化钠5g

琼脂15g

最终pH8.5±0.2

使用方法：

1、称取碱性琼脂45g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。待冷至50℃左右，倾入无菌平皿，凝固后备用。

2、取待检菌的新鲜纯培养物划线种于琼脂平板上，于36±1℃培养20—24h。

3、观察结果。

碱性琼脂按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
长尾绿猴肾细胞;4647氧化镧(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide质量规格：>99%,EP

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氯化镁六水(分子生物学)Magnesium chloride, hexahydrate质量规格：>99%,分子生物学级

CL-0217SP2/0(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2醋酸锰四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate质量规格：>98%,BC

LX-2, 人肝星形细胞株 小鼠细胞(分泌促生长激素分泌激素)，GT1.1细胞 OK(负鼠(opossum)肾细胞)神经氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens质量规格：≥10 units/ mg

人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]乙酸镍四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate质量规格：>98%,BC
人细胞;HOS苯扎氯铵（标准品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride质量规格：供HPLC法检查用和容量法含量测定用

人成纤维细胞(HMF)(5×105)苯扎氯铵（标准品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride质量规格：含量测定用

CM-H112人脂肪细胞完全培养基100mL甲硫酸新斯的明(标准品)Neostigmine methyl sulfate质量规格：HPLC>99%,标准品

小鼠浆细胞瘤;MPC-11 小鼠直肠平滑肌细胞完全培养基 100mL甘草酸二钾（标准品）Dipotassium glycyrrhizinate质量规格：含量测定

rEPC，大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus尼美舒利（标准品）Nimesulide质量规格：含量测定
小鼠成骨细胞完全培养基 100mLDL-α-羟基戊二酸二钠质量规格：98%,GC,进分sigma 94577DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt

P388D1小鼠淋巴样瘤细胞 P388D1 mouse lymphoid tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+90%马血清+10%FBS地美溴胺质量规格：>99%,BRDemecarium Bromide

IL12B Protein Human 重组人 IL12B / P40 蛋白 (Fc 标签)喹哪啶红质量规格：ARQuinaldine Red

人脑微内皮细胞 (HBMEC) ( 5×105 ) 大鼠主动脉平滑肌细胞 细胞名称酚酞(98%)质量规格：>98%Phenolphthalein

CM-R057大鼠肾系膜细胞完全培养基100mL四溴酚蓝质量规格：INDTetrabromophenol blue 
碱性琼脂培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。