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公司实验室

胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)
(含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤)(EB增菌液基础)

(TrypticSoyBrothWithYeastExtract)(Tryptonesoyayeastextractbroth)

(ListeriaEnrichmentBrothBase)

用途：

胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤广泛用于细菌的培养，特别用于食品中李斯特氏菌的增菌培养(GB/T4789.30-2010和SN0184-2005，ISO标准)。

原理：

胰胨、多价胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;萘啶酮酸和盐酸吖啶黄为选择性抑菌剂，。

培养基配方(每升)：

胰胨17g

多价胨3g

酵母膏粉6g

氯化钠5g

磷酸氢二钾2.5g

葡萄糖 2.5g

最终pH7.3±0.2

使用方法：

1、称取胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤36g，加入1000 mL蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15分钟。

2、冷却至45℃，每225 mL基础培养基中加入配套试剂(SR0090)1支(萘啶酮酸9mg和盐酸吖啶黄3.375mg)配成EB增菌液。

3、无菌取样品25g(mL)放灭菌均质器中加225mLEB增菌液中，充分搅拌均质，于30±1℃培养48h。

4、观察结果。

胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
正常大鼠肾细胞;NRK-52E依替米星（标准品）Etimicin质量规格：效价测定

CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人细胞裂解液 (阳性对照) 巴龙霉素（标准品）Paromomycin质量规格：效价测定

人成纤维细胞完全培养基 100mL拉宁（标准品）Teicoplanin 质量规格：效价测定

T6细胞，人舌癌细胞 甲型副伤寒沙门氏菌 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E制霉菌素（标准品）Nystatin质量规格：效价测定

CXCL14 Protein Human 重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白肌苷5'-单1酸Inosine 5'-Monophosphate(IMP)质量规格：>98%,BR
人色素瘤细胞;A875蓖麻油酸甲酯（标准品）Methyl ricinoleate质量规格：分析标准品,≥99%(GC)

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 山嵛酸甲酯（标准品）Methyl behenate质量规格：分析标准品

人肝窦内皮细胞完全培养基 100mL二十四烷酸甲酯（标准品）Methyl tetracosanoate质量规格：分析标准品

LLC细胞，小鼠细胞 CHO(中国仓鼠卵巢细胞) 恒河猴肺细胞;RM-L1芥酸甲酯（标准品） Methyl cis-13-docosenoate质量规格：>90.0%(GC)

PPBP Protein Rat 重组大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签)十九酸（标准品）Nonadecanoic Acid质量规格：分析标准品,≥99.5% (GC)
小鼠细胞;Sp2/0-Ag14盐酸前黄素质量规格：>98%,BRProflavine hydrochloride

2. 皮肤细胞系统阿洛西林钠质量规格：BR,Azlocillin sodium

U251人细胞格尔德霉素;格尔德美素质量规格：>98%,BRGeldanamycin

人结直肠腺癌细胞;COLO 205 大鼠肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL巴佛洛霉素A1质量规格：>95%,BRBafilomycin A1, from Streptomyces griseus

MLA144 MLA144长臂猿细胞非达霉素质量规格：>98%,BRFidaxomicin 
胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。