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公司实验室

PALCAM琼脂基础
(PalcamAgarBase)

用途：

PALCAM琼脂基础用于单增李斯特氏菌的选择性分离培养(GB4789.30-2010和SN/T0184-2005)。

原理：

蛋白胨提供生长必须的碳氮源;酵母膏粉和淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;李斯特氏菌水解七叶苷与铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;甘露醇是可发酵的糖，酚红是pH指示剂;氯化锂和其它的抗生素能抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌;琼脂是培养基的凝固剂。

PALCAM琼脂基础配方(每升)：

酪蛋白胰酶消化物10.0g

心胰酶消化物3.0g

玉米淀粉1.0g

肉胃酶消化物5.0g

酵母膏粉8.0g

氯化钠5.0g

葡萄糖0.5g

甘露醇 10.0g

柠檬酸铁铵 0.5g

七叶苷 0.8g

氯化锂 15.0g

酚红 0.1g

琼脂 15.0g

最终pH 7.2±0.2

使用方法：

1、称取PALCAM琼脂基础71.88g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，待冷至常温，备用。

2、临用时加热溶化琼脂，冷却至50℃，每100.0ml基础培养基加入配套试剂1支(SR0140)(盐酸吖啶黄素0.05mg、硫酸多粘菌素B 1mg、头孢他啶2.0mg)，摇匀后倾注灭菌培养皿。

3、取待检菌划线接种于PALCAM平板上，于35℃±1℃培养24h～48h。

4、观察结果。李斯特氏菌在PALCAM平板上生长24h后菌落呈黑色，直径为1mm，在其周围形成一个黑色环，培养48h，菌落仍呈黑色，直径2mm～3mm，除在菌落周围有一环外，在菌落中心部位的深层也形成黑点。

PALCAM琼脂基础按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
大鼠肺大平滑肌细胞完全培养基 100mL(牛)INSULIN质量规格：BR，27U/mg,进分

FRhK-4细胞，恒河猴胚肾细胞 EB-3 [EB3](人淋巴样Butt细胞) CM-H026人淋巴内皮细胞完全培养基100mLL-天门冬氨酸钾L-Aspartate Potassium质量规格：>99%,BR

BTC Protein Human 重组人 BTC / Betacellulin 蛋白辅酶Q10,泛醌Coenzyme Q10,Ubiquinone质量规格：>98%,BR

MKN45(人细胞) 5×106cells/瓶×2 皮下脂肪细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)辅酶Q10(标准品)Coenzyme Q10质量规格：HPLC≥98%，标准品

上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)维生素A醋酸酯（标准品）vitamin A acetate质量规格：HPLC≥99%，标准品
EC9706 表戈米辛O（标准品）Epigomisin O质量规格：HPLC≥98%,标准品

SW620人细胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS琥珀酸钠（标准品）Hydrocortisone sodium succinate质量规格：含量测定

TNFSF8 Protein Rat 重组大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)回拉西坦;茴拉西坦（标准品）Aniracetam质量规格：含量测定

人胚胎绒毛细胞(HAF)(1×106 ) 细胞名称 种属卡络磺钠（标准品）Carbazochrome sodium sulfonate质量规格：HPLC≥98%，标准品

人上皮细胞;Hep-2卡络磺钠Carbazochrome sodium sulfonate质量规格：>98%,BR
小鼠颗粒细胞MGC超细高岭土(1250(11um))质量规格：1250(11um)Kaolin(superfine)

猴肾细胞;vero IgRCD4- 慢性髓原，K562细胞 BxPC-3(原位*腺癌细胞)超细高岭土(3000(5um))质量规格：3000(5um)Kaolin(superfine)

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0923磺胺醋酰钠 SA-NA（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Sufacetamide sodium

CFH Others Human 人 CFH / Compleme Factor H 人细胞裂解液 (阳性对照) 舒必利质量规格：>98.5%,EP6.0Sulpiride

CM-R077大鼠外膜成纤维细胞完全培养基100mL他达那非质量规格：>99%Tadalafil 
PALCAM琼脂基础培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。