冷冻保存细胞之方法？
大鼠成纤维细胞培养试剂盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细大鼠成纤维细胞培养试剂盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts说明书！

大鼠成纤维细胞培养试剂盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts

     大鼠成纤维细胞分离自正常大鼠组织，呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。成纤维细胞是结缔组织中最常见的一种细胞。可在后修复组织。 虽然组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的组织片能使得组织中成细胞的一些功能特性发生改变，从而将成细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成细胞。本体系提供了*的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以*程度地降低所培养的成原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠成纤维细胞培养试剂盒适合于培养人的成组织细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠成纤维细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠成纤维细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠成纤维细胞成纤维抑制剂（1ml（500x）） （4）大鼠成纤维细胞组织洗液（5x100 ml） （5）大鼠成纤维细胞生长因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）大鼠成纤维细胞基础培养基（5x100 ml） （7）大鼠成纤维细胞组织预备液（1 x100 ml） （8）大鼠成纤维细胞培养试剂盒使用说明书
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
大鼠成纤维细胞培养试剂盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞加巴喷丁-d4Gabapentin-d4质量规格：美国进口

人胚肺二倍体细胞;HEL-2 人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL加巴喷丁-内酰胺Gabapentin-lactam质量规格：美国进口

人气管平滑肌细胞RNAHTSMC miRNA5 μg加巴喷丁相关化合物BGabapentin Related Compound B质量规格：美国进口

CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 加巴喷丁相关化合物EGabapentin Related Compound E质量规格：美国进口

小耳猪肾细胞;SEPfk加巴喷丁相关化合物DGabapentin Related Compound D质量规格：美国进口

CLEC1B Others Human 人 CLEC1B / CLEC2 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯磺酸贝托司汀质量规格：>98.5%Bepotastine besilate

HS683 人脑细胞叶绿素铜钠盐质量规格：>95%,BRSodium copper chlorophyllin

SW 780 [SW-780, SW780]人膀胱移行细胞癌 SW 780 [SW-780, SW780] in human bladder ansitional cell carcinoma L-15培养基(GIBCO)+10%FBS溴螨酯标准溶液(100μg/ml,u=2%)质量规格：100μg/ml,u=2%Bromopropylate solution

VEGFA Protein Danio rerio (zebrafish) 重组斑马鱼 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白溴螨酯标准溶液(10μg/ml,u=2%)质量规格：10μg/ml,u=2%Bromopropylate solution

大鼠淋巴纤维细胞(RLF)(5×105) BPH-1, 人细胞 Human溴硝醇(标准品)质量规格：分析标准品Bronopol

HSAEpC-c 人类气道上皮细胞(HSAEpC) 500,000cells 组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml3-氧西酞普兰质量规格：美国进口3-Oxo Citalopram

原代肾实质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml(R)-草酸西酞普兰质量规格：美国进口(R)-Citalopram Oxalate

IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 西酞普兰N-氧化物质量规格：美国进口Citalopram N-Oxide

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2(S)-西酞普兰N-氧化物质量规格：美国进口(S)-Citalopram N-Oxide

Calu-6细胞，人细胞系(未分化) 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞 CM-M097小鼠皮下脂肪细胞完全培养基100mL去甲基雷诺嗪质量规格：美国进口Desmethyl Ranolazine

大鼠成纤维细胞培养试剂盒 Rat Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts人绒毛膜内皮细胞西罗莫司，英文名或英文缩写：Rapamycin，级别：BR，85%，规格：2KU

人胚肾细胞;293 Cells, low passage 人心室肌细胞完全培养基 100mL联本酰 Bqnzil 134-81-6

人RNAHPF miRNA5 μg尿苷-5′-单嶙酸，英文名或英文缩写：U 5′-P，级别：BR，98%，规格：50毫克

IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 正十三烷，英文名或英文缩写：Tridecane，级别：SP，98.5%，规格：5克

小香猪皮肤细胞;SSC-S2MTT 250mg/500mg/1g Amresco分装

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。