冷冻保存细胞之方法？
小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells说明书！

小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells

     脑是中枢的主要部分，位于颅腔内。低等脊椎动物的脑较简单。人和哺乳动物的脑特别发达，可分为大脑、小脑和脑干三部分。其中，小鼠脑微内皮细胞的主要功能是维持内外的动态平衡，合成和分泌细胞因子和介质，维持凝血和纤溶的动态平衡。小鼠脑微内皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。 利用本公司试剂盒中提供的脑动脉组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的脑动脉组织能使得脑微内皮细胞一些功能特性发生改变，从而将内皮细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养小鼠脑微内皮细胞。本体系提供了*的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以*程度地降低所培养的脑微内皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的脑微内皮细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠脑微内皮细胞组织解离液（3×1ml） （2）小鼠脑微内皮细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠脑微内皮细胞成纤维抑制剂（1ml（500X）） （4）小鼠脑微内皮组织洗液（5 x 100 ml） （5）小鼠脑微内皮细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）小鼠脑微内皮细胞基础培养基（5 x 100ml） （7）小鼠脑微内皮组织预备液（1 x 100 ml） （8）小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒使用说明书
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

Hs 578T(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2甲硝唑杂质A（2-甲基-5-硝基咪唑）标准品2-Methyl-5-nitroimidazole质量规格：检查

Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人淋巴细胞分离液) 500ml硫酸双肼屈嗪（标准品）Dihydralazine sulphate质量规格：含量测定

人前脂肪细胞-内脏裂解物HPA-v L盐酸阿米替林（标准品）Amitriptyline HCl 质量规格：含量测定

CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 异丙托溴铵（标准品）IPRATROPIUM BROMIDE质量规格：含量测定

绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞;U14-GFP赖氨匹林（标准品）DL-Lysine Acetylsalicylate质量规格：UV法含量测定

PGC Others Rat 大鼠 Pepsinogen C / PGC 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯磺酸钠(>98%，BR)质量规格：>98%，BRSodium benzenesulfonate

B16瘤 过氧化物歧化酶(SOD)质量规格：比活度：>5000 U/mg,BCSuperoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)

A549-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 A549-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells F-12K+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin盐酸克林霉素(标准品)质量规格：>800μg/mg,含量测定Clindamycin HCl

GDNF Protein Rat 重组大鼠 GDNF 蛋白 (His 标签)盐酸维拉帕米质量规格：>99%,USP32,BR,可用于细胞培养Verapamil HCl

人肾系膜细胞 (HRMC)(1×106 ) 细胞名称 种属盐酸维拉帕米（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Verapamil HCl

人Wilms细胞;G401 大鼠气管平滑肌细胞完全培养基 100mL焦地黄苯乙醇甙B1（标准品）质量规格：HPLC≥98%,标准品Jionoside B1

长尾绿猴肾细胞;4647N-6022质量规格：>98%,GSNOR抑制剂N6022

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 巴柳氮钠（标准品）质量规格：含量测定Balsalazide

CL-0217SP2/0(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2依帕司他（标准品）质量规格：UV法含量测定Epalrestat

LX-2, 人肝星形细胞株 小鼠细胞(分泌促生长激素分泌激素)，GT1.1细胞 OK(负鼠(opossum)肾细胞)三苯甲基坎地沙坦西来替昔酯质量规格：>99%Trityl candesartan cilexetil

小鼠脑微内皮细胞培养试剂盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial CellsCSF1 Protein Mouse 重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白脑心浸液100毫升

SW620(人细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-类胱酸 L-Homocystine,≥98% 626-72-2 100MG 通用试剂

人肺泡上皮细胞HPAEpiC流醋天仙子安 HyoscycMinq Sulfctq 6832-16-1

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人细胞裂解液 (阳性对照) 化高铁血红蛋白参比液100g100张RT

KM9304 EBV-转化人淋巴细胞(彝族)144-48-9化乙酰胺(2-8℃)2-Iodoacetamide

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。