冷冻保存细胞之方法？
大鼠内皮细胞 RatCoronary：NormalCoronaryArteryEndothelialCells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细大鼠内皮细胞 RatCoronary：NormalCoronaryArteryEndothelialCells说明书！

大鼠内皮细胞 RatCoronary：NormalCoronaryArteryEndothelialCells

     产品描述：大鼠内皮细胞分离自正常大鼠内皮细胞，呈单层扁平分布。内皮细胞或内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。它形成的内壁，是管腔内血液及其他壁（单层）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由直至最少的微。公司提供的大鼠内皮细胞，采用胶原酶消化制备而来。细胞的培养采用公司专利产品大鼠内皮细胞培养试剂盒(RatcoronaryPrimaCell:NormalcoronaryarteryendothelialcellsCatNo.3-7204)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，大鼠内皮细胞传3-5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
大鼠内皮细胞 RatCoronary：NormalCoronaryArteryEndothelialCells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

CD59 Others Human 人 CD59 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸氟桂利嗪Flunarizine Hydrochloride质量规格：>99%,BR

MouseS 小鼠皮肤成纤维样细胞盐酸非索非那定（标准品）Fexofenadine Hydrochloride质量规格：HPLC>98%,标准品

猕猴肺细胞;MML2盐酸非索非那定Fexofenadine Hydrochloride质量规格：>98%,BR

WM451, 人细胞尼扎替丁（标准品）Nizatidine质量规格：HPLC法含量测定

人慢性髓系细胞;K562 大鼠肺大平滑肌细胞完全培养基 100mL醋谷胺/乙酰谷酰胺（标准品）Aceglutamide质量规格：含量测定

Hep 3B(人细胞) 5×106cells/瓶×2垂体腺苷酸环化酶激活肽-27，人，小鼠，绵羊，猪，大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)质量规格：>95%,BR

AGRP Others Human 人 AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) 垂体腺苷酸环化酶激活肽-27（6-27），人，鸡，小鼠，猪，大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)质量规格：>95%,BR

人角膜上皮细胞HCEpiC垂体腺苷酸环化酶激活肽-38（16-38），人，鸡，小鼠，绵羊，猪，大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)质量规格：>95%,BR

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人细胞裂解液 (阳性对照) 垂体腺苷酸环化酶激活肽相关肽（1-29），大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)质量规格：>95%,BR

HMy2.CIR 人 B 淋巴母细胞胰多肽，人Pancreatic Polypeptide,human质量规格：>95%,BR

P3X63Ag8.653小鼠细胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS多奈哌齐质量规格：>98%Donepezil

IL12A & IL12B Protein Human 重组人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白多尼培南(标准品)质量规格：>99%,标准品,一水合物Doripenem

USMC(大鼠平滑肌细胞) 5×106cells/瓶×2 HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞米尔贝肟质量规格：A3+A4>97%Milbemycin oxime

CM-R089大鼠皮肤肥大细胞完全培养基100mL伐地考昔质量规格：>99%,BRValdecoxib

CD14 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD14 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素质量规格：>98%,BRGastrin I,human

大鼠内皮细胞 RatCoronary：NormalCoronaryArteryEndothelialCellsPTPRA Others Human 人 PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 利巴韦林5'-单磷酸二锂盐质量规格：美国进口Ribavirin 5'-Monophosphate, Dilithium Salt

瘤牛皮肤细胞;BIN-S11-β-D-呋核亚硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯质量规格：美国进口1-β-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic Acid Methyl Ester

COLO-320细胞，腺癌细胞 直肠腺癌,HR-8348细胞 人巨细胞细胞株;Mo7e3-羧氨基利巴韦林盐酸盐质量规格：美国进口Viramidine Hydrochloride

T739小鼠肺腺株;LA79525-O-去乙酰基利福布汀质量规格：美国进口25-O-Deacetyl Rifabutin

HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人细胞裂解液 (阳性对照) HDAC靶点抑制剂质量规格：>98%CUDC-101

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。