冷冻保存细胞之方法？
小鼠脑内皮细胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细小鼠脑内皮细胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells说明书！

小鼠脑内皮细胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells

     产品描述：小鼠脑内皮细胞的主要功能是维持内外的动态平衡，合成和分泌细胞因子和介质参与免疫反应，维持凝血和纤溶的动态平衡。公司提供的小鼠脑内皮细胞，采用采用胶原酶消化制备而来。细胞的培养采用公司专利产品小鼠脑内皮细胞培养试剂盒(MouseBrainPrimaCell：NormalCerebralVenousVascularEndothelialCellsCatNo.3-4491)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，小鼠脑内皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
小鼠脑内皮细胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

人间充质干细胞-脐带 Human盐酸文拉法辛（标准品）Venlafaxine hydrochloride质量规格：>98%,标准品

TPST1 Others Human 人 TPST1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸文拉法辛Venlafaxine hydrochloride质量规格：>98%,BR

杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX质量规格：>95%

BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸罗哌卡因（标准品）Ropivacaine mesylate质量规格：HPLC>98%,标准品

原代上皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml甲磺酸罗哌卡因Ropivacaine mesylate质量规格：>98%,BR

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照) 蛋白酶K(进分)Proteinase K质量规格：≥30units/mg protein,sigma分装

CM-H025人*上皮细胞完全培养基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K质量规格：≥30units/mg protein,sigma原装

HuTu-80细胞，人十二指肠腺癌细胞 人细胞,HME2细胞 人肝永生化细胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制剂Chymostatin质量规格：进分

H9c2(2-1) (大鼠心肌细胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(进口)Leupeptin 质量规格：≥95%,进口半硫酸盐

CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制剂Pepstatin A microbial质量规格：≥90%,进分

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9803氢氧化铝(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAluminum hydroxide

CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人细胞裂解液 (阳性对照) 磷酸铵三水(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAmmonium phosphate, tribasic , trihydrate

人子宫内膜上皮细胞完全培养基 100mL雷帕霉素/西罗莫司（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Rapamycin(Sirolimus)

FO细胞，小鼠细胞 3T6-Swiss albino(胚胎成纤维细胞) 人脐内皮细胞(人细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]甲磺酸雷沙吉兰质量规格：>98.5%Rasagiline Mesylate

CXCL9 Protein Mouse 重组小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白白藜芦醇质量规格：>97.0%,BRResveratrol

小鼠脑内皮细胞 MouseBrain:NormalCerebralVenousVascularEndothelialCellsNRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 标签)Bz-rA亚磷酰胺单体质量规格：>98%,BRBz-rA Phosphoramidite

MA-891(小鼠癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)i-bu-rG亚磷酰胺单体质量规格：>98%,BRi-bu-rG Phosphoramidite

神经星形胶质细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)PF299804（EGFR抑制剂）质量规格：>99%,可用于细胞培养Dacomitinib

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人细胞裂解液 (阳性对照) Ac-rC亚磷酰胺单体质量规格：>98%,BRAc-rC Phosphoramidite

大鼠肾足突细胞完全培养基 100mLRp-腺苷 3′,5′-环单硫代磷酸酯钠盐质量规格：美国进口Rp-Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, Sodium Salt

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。